Techniky pro extrakci a izolaci přírodních produktů: komplexní recenze

komponenty v extraktu z výše uvedené metody jsou složité a obsahují řadu přírodních produktů, které vyžadují další separace a čištění k získání aktivní frakce nebo čisté přírodní produkty. Separace závisí na fyzikálním nebo chemickém rozdílu jednotlivých přírodních produktů., Chromatografie, zejména sloupcová chromatografie, je hlavní metodou používanou k získání čistých přírodních produktů ze složité směsi.

Separace založené na adsorpční vlastnosti

Adsorpční kolony chromatografie je široce používán pro separaci přírodních produktů, a to zejména v počáteční fázi separace, díky své jednoduchosti, vysoké kapacity a nízké náklady adsorbentů, jako jsou silikagel a makroporézní pryskyřice. Separace je založena na rozdílech mezi adsorpčními afinitami přírodních produktů pro povrch adsorbentů., Výběr adsorbentů (stacionární fáze), stejně jako mobilní fáze je rozhodující pro dosažení dobré separace přírodních produktů, maximalizovat využití cílových sloučenin a vyhnout se nevratné adsorpce cílové sloučeniny na adsorbenty.

silikagel je nejrozšířenější adsorbent ve fytochemickém vyšetřování. Odhaduje se, že téměř 90% fytochemické separace (preparativní stupnice) bylo založeno na silikagelu. Silikagel je polární absorbent se skupinami silanolu. Molekuly jsou zachovány silikagelem prostřednictvím vodíkových vazeb a interakcí dipól-dipól., Polární přírodní produkty se tak uchovávají déle ve sloupcích silikagelu než nepolární. Někdy mohou některé polární přírodní produkty podstoupit nevratnou chemisorpci. Deaktivace silikagelu přidáním vody před použitím nebo použitím mobilní fáze obsahující vodu oslabí adsorpci. Závažné odkalovacích může dojít při oddělování alkaloidů na silikagel, a přidáním malého množství amoniaku nebo organické aminy, např. triethylamin může snížit nenápadné., Dvanáct alkaloidů patřících do skupiny methyl chanofrutikosinátů včetně šesti nových alkaloidů, prunifolinů a-F(68-73, obr. 11), byly získány z listu Kopsia arborea tím, že počáteční chromatografií na silikagelové koloně za použití gradientu MeOH–Chci3 jako mobilní fáze následuje odstředivé TLC za použití amoniaku nasycené Et2O–hexanu nebo EtOAc/hexan systémy jako eluentu .

Alumina (oxid hlinitý), je silně polární adsorbent používá v oddělení přírodních produktů, a to zejména v separaci alkaloidů. Silné pozitivní oblasti Al3+ a základních míst v hlinitého ovlivňující snadno polarizační sloučenin vést k adsorpci na hliník, který je odlišný od toho, na silikagel., Aplikace oxidu hlinitého při separaci přírodních produktů se v posledních letech výrazně snížila, protože může během separace katalyzovat dehydrataci, rozklad nebo izomerizaci. Zhang a Su hlásili chromatografický protokol používající základní oxid hlinitý k oddělení taxolu(74, obr. 11) z extraktu z Taxus cuspidate kalus kultur a zjistil, že oživení taxolu bylo více než 160%. Zjistili, že zvýšení taxolu pocházelo z izomerizace 7-epi-taxolu (75) katalyzovaného oxidem hlinitým., Bylo také zjištěno, že malé množství taxolu může být rozloženo na baccatin III (76) a 10-deacetylbaccatin III (77) ve sloupci oxidu hlinitého . Další vyšetřování oddělení taxol na kyselé, neutrální a základní hlinitého uvedeno, že Lewis souci a základní činnost jader na povrchu oxidu hlinitého vyvolané izomerace 7-epi-taxol pro taxol .

struktury polyamidů používaných v chromatografii obsahují jak akrylové, tak amidové skupiny., Hydrofobní a/nebo vodíková vazba interakce se objeví v polyamidové kolony chromatografie v závislosti na složení mobilní fáze. Když se jako mobilní fáze používají polární rozpouštědla, jako jsou vodná rozpouštědla, působí polyamidy jako nepolární stacionární fáze a chování chromatografie je podobné chromatografii s obrácenou fází. Naproti tomu polyamidy působí jako polární stacionární fáze a chování chromatografie je podobné normální fázové chromatografii., Chromatografie kolony polyamidu je běžným nástrojem pro separaci přírodních polyfenolů včetně antrachinonů, fenolických kyselin a flavonoidů, jejichž mechanismy jsou připisovány tvorbě vodíkové vazby mezi absorbenty polyamidu, mobilní fází a cílovými sloučeninami. Gao et al. studoval chromatografické chování polyfenolů včetně fenolických kyselin a flavonoidů na polyamidovém sloupci. Bylo zjištěno, že polyamid fungoval jako akceptor vodíkové vazby a počet fenolických hydroxylů a jejich polohy v molekule ovlivnily sílu adsorpce ., Kromě polyfenolů bylo také hlášeno oddělení jiných typů přírodních produktů chromatografií ve sloupci polyamidu. Celkové saponiny Kuqingchy mohou být obohaceny chromatografií ve sloupci polyamidu, což významně snížilo systolický tlak SHR rat . Použití směsi dichlormethanu a methanolu v přechodu jako eluentu, sedm hlavních isochinolin alkaloidů v Coptidis Rhizoma včetně berberin (39), coptisine (40), palmatine (41), jatrorrhizine (42), columbamine (78), groenlandicine (79) (Obr. 4) a magnoflorin (80, obr., 11) byly odděleny v jednostupňové chromatografii polyamidového sloupce .

Adsorpční makroporézní pryskyřice jsou polymerní adsorbenty s makroporézní struktury, ale bez iontoměničové skupiny, které lze selektivně adsorbovat téměř jakýkoli typ přírodních produktů. Oni jsou široce používány buď jako samostatný systém, nebo jako součást předčištění proces pro odstranění nečistot nebo obohacení cílových sloučenin z důvodu jejich výhod, mezi které patří vysoká adsorpční kapacita, relativně nízká cena, snadná regenerace a jednoduché stupnici-up., Adsorpční mechanismy adsorpčních makroporézních pryskyřic zahrnují elektrostatické síly, vodíkové vazby, komplexní tvorbu a prosévací akce mezi pryskyřicemi a přírodními produkty v roztoku. Povrchová plocha, průměr pórů a polarita jsou klíčovými faktory ovlivňujícími kapacitu pryskyřic . 20(S)-protopanaxatriol saponiny (PTS) (81) a 20(S)-protopanaxadiol saponiny (PDS) (82, Obr. 11) jsou známé jako dvě hlavní bioaktivní složky v kořene Panax notoginseng., PTS a PDS byly úspěšně odděleny vodnými roztoky ethanolu 30 a 80% (v/v) ze sloupce makroporózní pryskyřice D101. Chromatografické chování PDS a PTS bylo blízké chromatografii s obrácenou fází při porovnávání chromatografických profilů chromatografie makroporézní pryskyřice s CHROMATOGRAMEM HPLC na sloupci Zorbax SB-C18 . Nedávno, Meng et al. získané celkové saponiny Panacis Japonici Rhizoma (PJRS) za použití D101 makroporézní pryskyřice., Obsah čtyř hlavních saponinů, chikusetsusaponinů V (55), IV (56) a IVa (57) a pseudoginsenosidu RT1 (58) (obr. 8), v získaných PJR bylo více než 73%. PJRS sloužil jako standardní reference pro kontrolu kvality Panacis Japonici Rhizoma . Někteří vědci předpokládali, že hlavní adsorpční mechanismus mezi makroporézní pryskyřice a polyfenolů byla spojena s tvorbu vodíkové vazby mezi atomem kyslíku z éteru dluhopisů pryskyřice a atom vodíku z fenolické hydroxylové skupiny fenolu., Interakční síla vodíkové vazby byla významně ovlivněna hodnotou pH roztoku .

dusičnan stříbrný je další užitečnou pevnou podporou při separaci přírodních produktů. Tyto přírodní produkty obsahující π elektrony reverzibilně interagují s ionty stříbra a vytvářejí polární komplexy. Čím větší je počet dvojných vazeb nebo aromaticity přírodního produktu,tím silnější je komplexace. Dusičnan stříbrný je obvykle impregnován na silikagel (SNIS) nebo oxid hlinitý pro separaci. Několik výzkumných skupin uvedlo oddělení mastných kyselin na SNIS . Wang et al., hlásil izolaci zingiberenu ze zázvorového oleoresinu pomocí chromatografie . Pár izomerů, kyselina brasiliensová (83, obr. 11) a kyselina isobrasiliensová (84) byly odděleny od Calophyllum brasiliense Lemos et al. na SNIS sloupku . Některé výzkumné skupiny také aplikovaly dusičnan stříbrný ve dvoufázovém systému ve vysokorychlostní protiproudové chromatografii (HSCCC) ke zlepšení separace. Xanthochymol (85) a guttiferone E (86) jsou dvojice π bond benzofenon izomerů z Garcinia xanthochymus pomocí AgNO3-HSCCC., Eluční řád izomerů vazby π v této separaci AgNO3-HSCCC je vnitřní π vazba (dříve) < terminál, který je totožný s řádem pozorovaným z chromatografie sloupce SNIS .

Oddělení na základě rozdělovací koeficient:

Rozdělovací chromatografie (PC), následuje extrakce kapalina–kapalina zásadě založena na relativní rozpustnosti ve dvou různých nemísitelných kapalin. V počáteční fázi byla jedna kapalná fáze potažena pevnou matricí (silikagel, uhlík, celulóza atd.) jako stacionární fáze a další kapalná fáze byla použita jako mobilní fáze., Nevýhoda snadno odstranitelné stacionární fáze a neopakovatelných výsledků vedla k tomu, že tento druh PC je dnes zřídka používán. Vázaná fáze, ve které je kapalná stacionární fáze chemicky vázána na inertní podpěru, která se používá jako stacionární fáze, překonává tyto nevýhody. Komerčně dostupné alkyl jako C8 a C18, aryl, kyano a amino nahradit silany jsou často používány jako vázané fáze, které jsou široce používány k oddělení různých přírodních produktů, a to zejména v konečný krok čištění.

tři PTS (notoginsenoside R1 (87) (obr., 11), ginsenosides Rg1 (55) (obr. 8) a Re (88) (obr. 11)) a dva PDS (obr. 3) byly dobře odděleny ve sloupci C18 pomocí systému EtOH–H2O jako mobilní fáze . Nová stacionární fáze oxidu křemičitého na bázi polyakrylamidu byla syntetizována společností Cai et al. a byl úspěšně aplikován při separaci galaktooligosacharidů a saponinů pařížské polyphylly s EtOH-H2O jako mobilní fáze .

protiproudová chromatografie (CCC) je druh PC, který drží kapalnou stacionární fázi gravitací nebo odstředivou silou., CCC byl zřídka používán v raných stádiích kvůli jeho špatnému stacionárnímu zadržování, dlouhé době separace a procesu náročnému na práci. CCC byla výrazně zlepšila v roce 1980, nicméně, když moderní CCC, včetně HSCCC a centrifugal partition chromatography (CPC), byly vyvinuty. Hydrodynamické systémy CCC, jako je HSCCC, mají pohyb planetární rotace kolem dvou rotujících OS bez rotujících těsnění, což nabízí proces nízkého poklesu tlaku. Hydrostatický CCC, např.,, centrifugal partition chromatography, používá pouze jeden rotační osy a má řadu propojených komor, aby pasti stacionární fáze, která nabízí vyšší retenci na stacionární fázi a vyšší tlak v systému, než HSCCC. Vysoký systémový tlak v CPC zabraňuje zlepšení rozlišení zvýšením délky sloupce. Vysoký výkon CCC (HPCCC) představuje novou generaci hydrodynamického CCC a pracuje stejným způsobem jako HSCCC, ale s mnohem vyšší úrovní g., Na HPCCC nástroje generovat více než 240 g, zatímco brzy HSCCC zařízení dal g-úrovně méně než 80 g. HPCCC zkracuje oddělení čas méně než hodinu, ve srovnání se několik hodin v předchozích HSCCC a může dosáhnout alespoň deset krát šířka pásma HSCCC nástroje ., Ve srovnání s konvenční kolony separační metoda s využitím pevné stacionární fáze, a to jak hydrostatické a hydrodynamické CCC systémy nabízejí několik výhod, včetně odstranění ireverzibilní adsorpce a vrchol nenápadné, vysoká nosnost, vysoká vzorku zotavení, minimální riziko denaturace vzorku a nízká spotřeba rozpouštědel. Omezení CCC spočívá v tom, že odděluje sloučeniny pouze v relativně úzkém poli polarity. Během posledních 20 let přitahovaly hsccc, HPCCC a CPC velkou pozornost v separační vědě a byly široce používány při oddělení přírodních produktů., Tang et al. vyvinul HSCCC metody využívající dvě-fáze rozpouštědlo systém obsahující ethyl-acetát–n-butanol–ethanol–voda (4:2:1.5:8.5, v/v/v/v) do samostatné šest flavonové C-glykosidy (89-94, Obr. 12), včetně dvou nových sloučenin z Lophatherum gracile . HSCCC, HPCCC a CPC byly také úspěšně aplikovány při separaci těkavého oleje, který je obtížné oddělit konvenční sloupcovou chromatografií., Šest těkavých sloučenin (curdione (95), curcumol (96), germacrone (97), curzerene (98), 1,8-cineol (99) a beta-elemene (100)) byly izolovány od KSČ z esenciální olej z Kurkumy wenyujin pomocí nonaqueous dvě-fáze rozpouštědlo systém, skládající se z petroletheru–acetonitril–aceton (4:3:1 v/v/v) ., Čtyři hlavní sesquiterpenoids (ar-turmerone (101), α-turmerone (102), β-turmerone (103), a E-atlantone (104)), se podobné struktury byly odděleny od esenciální olej z Curcuma longa v jediném HSCCC spustit pomocí dvou-fáze rozpouštědlo systém složený z n-heptanu–ethyl acetát–acetonitril–voda (9.5/0.5/9/1, v/v) a každá sloučenina dosaženo více než 98% čistoty . Linalool (105), terpinen-4-ol (106), α-terpineol (107), p-anisaldehyde (108), anetol (109) a foeniculin (110) byly úspěšně izolovány z esenciální olej z Pimpinella anisum tím, HPCCC pomocí postupného gradientová eluce ., Li et al. vyvinula metodu CPC pro separaci pačuli alkoholu (111) s nonaqueous ether–acetonitril (1:1, v/v) solventní systém. Více než 2 g pačuli alkoholu s více než 98% čistoty byly izolovány z 12,5 g esenciálního oleje ve sloupci 240 ml. Velký objem (několik litrů) sloupec byl přijat v komerčním hydrostatickém CCC a hydrodynamickém CCC zařízení pro separaci pilotního/průmyslového měřítka. Jen málo zpráv by mohlo být získáno kvůli obchodní důvěrnosti. Je obtížné posoudit, zda je hydrostatický nebo hydrodynamický CCC lepší pro průmyslové aplikace., Uživatelé si mohou vybrat různé typy CCC nástroje pro různé účely. Kdy stacionární fáze je špatně zachovány v hydrodynamické CCC v důsledku vysoké viskozity a malé hustoty, rozdíly mezi mobilní a stacionární fází, hydrostatický CCC je praktičtější než hydrodynamické CCC, protože retence na stacionární fázi hydrostatický CCC je méně citlivé na fyzikální vlastnosti kapalných systémů a bude mít vyšší retenci na stacionární fázi., Kdy stacionární fáze je dobře zachována v hydrodynamické CCC, vyšší separační účinnost, budou získávány z hydrodynamické CCC, než z hydrostatický CCC se stejnou kapalinou systém a podobné sloupci množství, protože hydrostatický CCC má relativně nízkou oddíl účinnosti vzhledem k omezenému stupeň míchání, a hydrodynamický systém poskytuje efektivní míchání přinést vysoký oddíl účinnosti.

Separace založené na molekulární velikost

oddělení přírodních produktů membránovou filtrací (MF) nebo gelové filtrační chromatografie (GFC) je na základě jejich molekulární velikosti.

Membránová filtrace (MF)

V MF, polopropustná membrána umožňuje menší molekuly procházejí a zachovává větší molekuly., MF přírodních produktů by mohla být charakterizována jako mikrofiltrace, ultrafiltrace a nanofiltrace na základě velikosti pórů aplikované membrány.

Membránová filtrace byla to mocný nástroj pro koncentraci, objasnění a odstranění nečistot v laboratoři, stejně jako v potravinářském a farmaceutickém průmyslu. Obsah celkových fenolů (338%), kyseliny chlorogenové (66) (obr. 10) (483%), theobromin (112, obr., 13) (323%), kofein (113) (251%), kondenzované taniny (278%) a saponiny (211%) ve vodném extraktu Ilex paraguariensis byly výrazně zvýšené u nanofiltrace . Vazebná membránová filtrace se aplikuje, když jeden krok membránové filtrace není uspokojivý. Sekvence mikrofiltrace, ultrafiltrace a nanofiltrace byla použita při izolaci bioaktivních složek z extraktu z olivových listů. Mikrofiltrace následovaná ultrafiltrací odstranila nečistoty větší než 5 kDa., Nanofiltrace obnovit antioxidační a antibakteriální polyfenoly a flavonoidy, a obsah hlavní složky, oleuropein (114), v nanofiltrace retentát byla soustředěna přibližně desetkrát .

Gelové filtrační chromatografie (GFC)

Gelové filtrační chromatografie je známý také jako gelové permeační chromatografie nebo size exclusion chromatografie., Malé molekuly mají v GFC delší retenční dobu než velké molekuly.

Sephadex je tvořen cross-linking dextran, a G-typy Sephadex byly použity pro separaci hydrofilních sloučenin, jako jsou peptidy , oligosacharidy a polysacharidy .

Sephadex LH20, hydroxypropylovaný derivát Sephadex G25, má hydrofobní i hydrofilní povahu. Adsorpční mechanismus byl také zapojen do separace pomocí Sephadex LH-20. Sephadex LH-20 může být použit pro separaci široké škály přírodních produktů buď ve vodném nebo nevodném systému rozpouštědel., Na feruloylated arabinoxylan oligosacharidy vytrvalých obilných zrn středně pšenice byly dobře odděleny Sephadex LH-20 pomocí 100% vody jako mobilní fáze . Tři nové pyrimidinové diterpeny, axistatiny 1-3(115-117, obr. 14) spolu se třemi známými formamides (118-120) byly izolovány z anti-rakovina aktivní CH2Cl2 zlomek Agelas axifera přes Sephadex LH-20 sloupců s řadou rozpouštědel systémy , následuje čištění pomocí Prep-HPLC .

Polyakrylamidové (bio-gel P) a zesíťované agarózy byly také použity v oddělení přírodních produktů.

Separace na základě iontové síly

Ion-výměnnou chromatografií (IEC) dělí molekuly na základě rozdílů v jejich čistý povrch poplatku. Některé přírodní produkty, jako jsou alkaloidy a organické kyseliny, které mají funkční skupinu schopnou ionizace, mohou být odděleny IEC., Nabité molekuly by mohly být chycen a propuštěn iontoměničové pryskyřice změnou iontové síly mobilní fáze (např. změně pH nebo koncentrace soli). Pro separaci alkaloidů byly použity kationtové iontoměničové pryskyřice, zatímco aniontové iontoměničové pryskyřice byly použity pro separaci přírodních organických kyselin a fenolů.

kladně nabité antokyany byly odděleny od neutrálních polyfenolických sloučenin v extraktu z ovoce Actinidia melanandra (kiwi) ošetřeného XAD-7 za použití iontoměničové pryskyřice dowex 50wx8 ., Feng a Zhao použita semi-preparativní chromatografie oddělit (−)epigallocatechin-gallát a (−)epikatechin-gallát (122) v čaj surový extrakt s polysacharidy na bázi slabě kyselé gel CM-Sephadex C-25 . Nový alkaloid, fumonisin B6 (123), spolu s známý alkaloid, fumonisinu B2 (124), byl izolován podle IEC přes Strata X-C, mixed-mode RP-katexové pryskyřice následuje reverse-phase chromatography z houby Aspergillus niger NRRL 326 kultur extrakt .

Další moderní separační techniky

Molekulární destilace (MD)

Molekulární destilací odděluje molekulární destilací za vakua při teplotě hluboko pod jeho bod varu. Jedná se o vhodnou destilační metodu pro separaci termosenzitivních a vysokomolekulárních sloučenin. Borgarello et al. získaný thymol (125, obr., 16) obohacovací frakce z oreganového esenciálního oleje molekulární destilací modelovanou umělými neuronovými sítěmi. Získaná frakce měla antioxidační vlastnosti a mohla stabilizovat slunečnicový olej . Tři druhy ftalátů byly účinně odstraněny ze sladkého oranžového oleje molekulární destilací za optimálních podmínek (teplota odpařování 50 °C, Tlak výparníku 5 kPa a průtok krmiva 0,75 ml/min) .

Preparativní plynovou chromatografií (Prep-GC)

Plynová chromatografie (GC) s vysokou separační účinnost a rychlé separace a analýzy je potenciálně ideální preparativní metoda pro separaci těkavých sloučenin. Vstřikovací port, sloupec, dělené zařízení a zachycovací zařízení zařízení zařízení GC musí být upraveno pro preparativní oddělení kvůli nedostatku komerčního Prep-GC .

pět těkavých sloučenin, jmenovitě curzeren (98) (6.,6 mg), β-elemen (100, obr. 12) (5.1 mg), curzerenone (126) (41.6 mg), curcumenol (127) (46.2 mg), a curcumenone (128) (21.2 mg) (Obr. 17), byly odděleny od methanol extrakt Kurkuma Oddenek tím, Prep-GC nad kolona z nerezové oceli balíčky s 10% OV-101 (3 m × 6 mm jsem.d.) po 83 jediné injekce (20 µl) . Prep-GC byl také použit pro separaci přírodních izomerů. Celkem 178 mg cis-asaron (129) a 82 mg trans-asaron (130) byly získány z esenciální olej z Acorus tatarinowii po 90 jediném injekce (5 µl) na stejném sloupci jako výše ., Přípravka-GC se stala důležitou separační metoda pro přirozené těkavé sloučeniny; nicméně, těžší vzorek zatížení a velkém průměru preparativní kolony zaměstnaných snížil účinnost . Mezitím, nevýhody Prep-GC, včetně nedostatku komerční Prep-GC zařízení, spotřeba velký objem nosného plynu, rozkladu thermolabile látek pod vysokým provozní teplota, obtíže zlomek sbírky, a nízká produkce, přesto omezit používání Prep-GC.

Superkritické fluidní chromatografie (SFC)

SFC použití superkritické kapaliny jako mobilní fáze. SFC integruje výhody obou GC a kapalinová chromatografie (LC) jako superkritické tekutiny mají vlastnosti vysoké rozpouštěcí schopnosti, vysoké vodivosti a nízké viskozity, což umožňuje rychlé a účinné separace., SFC tak může použít delší sloupec a menší částice stacionární fáze než HPLC, což poskytuje větší počet teoretických desek a lepší oddělení. SFC lze použít pro separaci netěkavých nebo tepelně labilních sloučenin, na které se GC nevztahuje. Systémy SFC jsou kompatibilní se širokou škálou různých detektorů, včetně těch, které se používají v systémech LC a GC., Polarita široce používané mobilní fáze, S-CO2, v SFC je blízko k polarity hexanu, s tím výsledkem, že SFC byla použita pro separaci nepolárních přírodní produkty, jako jsou mastné kyseliny, terpeny a éterické oleje pro mnoho let. Modifikátory eluentu, jako je methanol a acetonitril, zvyšují eluční sílu, což zvyšuje zájem o oddělení polárních přírodních produktů SFC .

Zhao et al. úspěšně odděleny tři páry 25 R/S diastereomerní spirostanol saponiny(131-136, obr., 18) ze spermatu TCM Trigonellae (semeno Trigonella foenum-graecum) na dvou sloupcích CHIRALPAK IC Spojených v tandemu . Yang et al. aplikovaná SFC, pro preparativní separace dvou párů 7-epimeric spiro oxindole alkaloidy (137-140) z stonky s háčky Uncaria macrophylla (rostlinný zdroj pro TCM Uncariae Ramulus Cum Uncis) na Viridis Prep oxid Křemičitý 2-EP OBD sloupci, za použití acetonitrilu s obsahem 0,2% DEA modifikované S-CO2. Nevodná mobilní fáze používaná v SFC zabránila tautomerizaci oddělených alkaloidů spiro oxindolu ., SFC se také používá při separaci přírodních enantiomerů. (R,S)-goitrin (141-142) je aktivní složkou TCM Isatidis Radix. Chirální separace (R) A (S) goitrinů byla úspěšně dosažena Prep-SFC na koloně Chiralpak IC pomocí acetonitrilu jako organického modifikátoru .

Molekulární potiskem technologií

Molekulární potiskem technologie byla atraktivní separační metody v posledním desetiletí díky své jedinečné vlastnosti, které patří vysoká selektivita, nízké náklady a snadná příprava. Mnoho komplementárních dutin s pamětí velikosti, tvaru a funkčních skupin molekul šablony je generováno, když jsou molekuly šablony odstraněny z molekulárně potištěného polymeru (MIP)., Molekula šablony a její analogy tak budou mít specifické rozpoznávání a selektivní adsorpci pro MIP. MIPs byly široce používány při separaci přírodních produktů nebo jako extrakční sorbenty v pevné fázi pro přípravu vzorků rostlinných materiálů k obohacení drobných sloučenin.

Ji et al . vyvinuté multi-šablony molekulárně potištěné polymery s použitím DL-tyrosinu a kyseliny fenylpyruvové jako molekuly šablony pro oddělení dencichinu(143, obr. 19) z vodního extraktu Panax notoginseng., Oba dencichine a šablony molekula DL-tyrosin (144) obsahují amino (NH2) skupiny a karboxylové kyseliny (COOH) skupiny, a další šablony molekuly, phenylpyruvic acid (145), α-keto kyseliny (COCOOH) skupiny, které lze nalézt také ve struktuře dencichine . Ma et al. vyvinul preparativní separační metodu pro oddělení solanesolu (146) od tabákových listů flash chromatografií založenou na MIP., Postup při makroekonomické nerovnováze byl připraven s methyl methakrylátu jako monomer, solanesol jako šablonu molekuly a ethylenglykol dimethacrylate jako crosslinker o pozastavení polymerace metodou. Celkem 370,8 mg solanesolu s čistotou 98,4% bylo odděleno od extraktu tabákových listů s výtěžkem 2,5% suché hmotnosti tabákových listů . Ty a kol. použité termo-citlivý magnetický MIP oddělit tři hlavní curcuminoids, kurkumin (147), demethoxycurcumin (148), a bisdemethoxycurcumin (149), z TCM Curcumae Longae Rhizoma (oddenek Curcuma longa)., Je navržen tak, termo-citlivý magnetický MIP ukázal dobré potisk faktorem pro curcuminoids v rozmezí mezi 2.4 a 3.1, thermo-vstřícnost a rychlé magnetické separace (5 s) .

Simulated moving bed chromatografie

Simulated moving bed (SMB) chromatografie využívá více kolon se stacionární fází (postel)., Protiproudem pohybu postel je simulován prostřednictvím otočné ventily, které periodicky přepínat vstupní (krmiva a eluentu) a výstupní (extrakt a rafinát). SMB proces je kontinuální separační metoda a výkonný nástroj pro rozsáhlé oddělení přírodních produktů s výhodou nižší spotřeby rozpouštědel za kratší dobu.

dva cyklopeptidy, cyklolinopeptidy C A E(150-151, obr., 20), byly získány z lněného oleje pomocí tři zóny SMBC s osmi preparativní HPLC na normální fázi sférický silikagel sloupce a pomocí absolutního ethanolu jako desorbent . Kang et al. vyvinut v tandemu SMB proces skládající se ze dvou čtyř-zone, SMB jednotek v sérii se stejnou velikostí částic adsorbentu v Ringu jsem a Ring II je oddělit paklitaxel (taxol, 74) (Obr. 11), 13-dehydroxybaccatin III (152) a 10-deacetylpaclitaxel (153). Paklitaxel byl obnoven v první SMB jednotky, zatímco 13-dehydroxybaccatin III a 10-deacetylpaclitaxel byly odděleny v druhé SMB jednotky ., Mun vylepšila tuto metodu SMB chromatografie pomocí různých velikostí částic adsorbentu v kruhu I a kruhu II . Superkritické tekutiny mohou být také použity jako desorbent v chromatografii SMB. Liang et al. úspěšně aplikován superkritický oxid uhličitý s ethanolem jako desorbent na tři zóny SMB oddělit resveratrol (60) (Obr. 9) a emodin (44) (obr. 4) ze surového extraktu TCM Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix .

Multi-dimenzionální chromatografické separace

komponenty v extraktu podrobeny separaci byly složité, a obecně, žádné čisté sloučeniny budou odděleny v jednom sloupci chromatografie. Vícerozměrná separace založená na extrakci pevné fáze a spojování více sloupců s různými stacionárními fázemi výrazně zlepšuje účinnost separace., S více komerčních více dimenzionální separace zařízení, která vstupují na trh, oddělení přírodních produktů je stále více rychlé, efektivní a automatizované.