los componentes en el extracto de los métodos anteriores son complejos y contienen una variedad de productos naturales que requieren una mayor separación y purificación para obtener la fracción activa o productos naturales puros. La separación depende de la diferencia física o química del producto natural individual., La cromatografía, especialmente la cromatografía en columna, es el principal método utilizado para obtener productos naturales puros a partir de una mezcla compleja.
separación basada en Propiedades de adsorción
la cromatografía en Columna de adsorción es ampliamente utilizada para la separación de productos naturales, especialmente en la etapa de separación inicial, debido a su simplicidad, alta capacidad y bajo costo de adsorbentes como gel de sílice y resinas macroporosas. La separación se basa en las diferencias entre las afinidades de adsorción de los productos naturales para la superficie de los adsorbentes., La selección de adsorbentes (fase estacionaria), así como la fase móvil es crucial para lograr una buena separación de los productos naturales, maximizar la recuperación de los compuestos objetivo y evitar la adsorción irreversible de los compuestos objetivo en los adsorbentes.
El gel de sílice es el adsorbente más utilizado en la investigación fitoquímica. Se estimó que casi el 90% de la separación fitoquímica (escala preparativa) se basó en gel de sílice. El gel de sílice es un absorbente polar con grupos silanol. Las moléculas son retenidas por el gel de sílice a través de enlaces de hidrógeno e interacciones dipolo–dipolo., Por lo tanto, los productos naturales polares se retienen más tiempo en columnas de gel de sílice que los no polares. A veces, ciertos productos naturales polares pueden sufrir quimisorción irreversible. La desactivación del gel de sílice mediante la adición de agua antes de su uso o el uso de una fase móvil que contiene agua debilitará la adsorción. Puede ocurrir una cola severa cuando se separan alcaloides en gel de sílice, y la adición de una pequeña cantidad de amoníaco o aminas orgánicas como la trietilamina puede reducir la cola., Doce alcaloides pertenecientes al grupo metílico chanofruticosinato incluyendo seis nuevos alcaloides, prunifolinas A-F(68-73, Fig. 11), se obtuvieron de la hoja de Kopsia arborea por cromatografía de columna de gel de sílice inicial utilizando gradiente MeOH–CHCl3 como fase móvil seguido de TLC centrífugo utilizando sistemas de et2o–hexano saturado de amoníaco o EtOAc/hexano como eluyente .
las Estructuras de los compuestos 68-88
la Alúmina (óxido de aluminio) es un fuerte polar adsorbente utilizado en la separación de productos naturales, especialmente en la separación de los alcaloides. El fuerte campo positivo de Al3+ y los sitios básicos en alúmina que afectan a los compuestos fácilmente polarizados conducen a la adsorción en alúmina que es diferente de la del gel de sílice., La aplicación de alúmina en la separación de productos naturales ha disminuido significativamente en los últimos años porque puede catalizar la deshidratación, descomposición o isomerización durante la separación. Zhang y Su reportaron un protocolo cromatográfico usando alúmina básica para separar taxol (74, Fig. 11) del extracto de cultivos de callos de Taxus cuspidate y encontró que la recuperación de taxol fue superior al 160%. Encontraron que el aumento del taxol provino de la isomerización del 7-epi-taxol (75) catalizado por la alúmina., También se encontró que una pequeña cantidad de taxol podría descomponerse en baccatina III (76) y 10-deacetilbaccatina III (77) en la columna de alúmina . Investigaciones posteriores sobre la separación de taxol en alúmina ácida, neutra y básica indicaron que el Lewis souci y los núcleos de actividad básica en la superficie de alúmina indujeron la isomerización de 7-epi-taxol a taxol .
Las estructuras de poliamidas utilizadas en la cromatografía contienen grupos acril y amida., La interacción hidrofóbica y/o de enlace de hidrógeno ocurrirá en la cromatografía de columna de poliamida dependiendo de la composición de la fase móvil. Cuando los solventes polares tales como solventes acuosos se utilizan como la fase móvil, las poliamidas actúan como la fase estacionaria no polar y el comportamiento de la cromatografía es similar a la cromatografía de fase inversa. En contraste, las poliamidas actúan como la fase estacionaria polar y el comportamiento de la cromatografía es similar a la cromatografía de fase normal., La cromatografía de columna de poliamida es una herramienta convencional para la separación de polifenoles naturales incluyendo antraquinonas, ácidos fenólicos y flavonoides, cuyos mecanismos se atribuyen a la formación de enlaces de hidrógeno entre absorbentes de poliamida, fase móvil y compuestos Diana. Gao et al. se estudió el comportamiento cromatográfico de polifenoles incluyendo ácidos fenólicos y flavonoides en columna de poliamida. Se encontró que la poliamida funcionaba como un aceptor de enlace de hidrógeno, y el número de hidroxilos fenólicos y sus posiciones en la molécula afectaban la fuerza de adsorción ., Además de los polifenoles, también se informó de la separación de otros tipos de productos naturales por cromatografía en columna de poliamida. Las saponinas Totales de Kuqingcha pueden ser enriquecidas por la cromatografía de columna de poliamida, que redujo significativamente la presión sistólica de la rata SHR . Usando una mezcla de diclorometano y metanol en un gradiente como eluyente, los siete alcaloides principales de isoquinolina en Coptidis Rhizoma incluyendo berberina (39), coptisina (40), palmatina (41), jatrorrhizina (42), columbamina (78), groenlandicina (79) (Fig. 4), y magnoflorine (80, Fig., 11) se separaron en una cromatografía de columna de poliamida de un paso .
Las resinas Macroporosas adsorbentes son adsorbentes poliméricos con estructuras macroporosas pero sin grupos de intercambio iónico que pueden adsorbir selectivamente casi cualquier tipo de productos naturales. Han sido ampliamente utilizados ya sea como un sistema independiente, o como parte de un proceso de pretratamiento para eliminar impurezas o enriquecer compuestos objetivo debido a sus ventajas, que incluyen alta capacidad de adsorción, costo relativamente bajo, fácil regeneración y fácil escalado., Los mecanismos adsorbentes de las resinas macroporosas adsorbentes incluyen fuerzas electrostáticas, enlaces de hidrógeno, formación compleja y acciones de tamizado de tamaño entre las resinas y los productos naturales en solución. La superficie, el diámetro de los poros y la polaridad son los factores clave que afectan a la capacidad de las resinas . 20 (s)-protopanaxatriol saponinas (PTS) (81) y 20 (S) – protopanaxadiol saponinas (PDS) (82, Fig. 11) se conocen como dos componentes bioactivos principales en la raíz de Panax notoginseng., El PTS y el PDS se separaron con éxito con soluciones de etanol acuoso al 30 y al 80% (v/v) de la columna de resina macroporosa D101, respectivamente. Los comportamientos cromatográficos de PDS y PTS fueron cercanos a la cromatografía de fase inversa cuando se compararon los perfiles cromatográficos de la cromatografía de columna de resina macroporosa con el cromatograma de HPLC en una columna de ZORBAX SB-C18 . Recientemente, Meng et al. se obtuvieron las saponinas Totales de Panacis Japonici Rhizoma (PJRS) utilizando resina macroporosa D101., El contenido de las cuatro saponinas principales, chikusetsusaponinas V (55), IV (56) e IVa (57), y pseudoginsenósido RT1 (58) (Fig. 8), en los RJP obtenidos fue superior al 73%. El PJRS sirvió como referencia estándar para el control de calidad de Panacis Japonici Rhizoma . Algunos investigadores asumieron que el principal mecanismo de Adsorción entre resinas macroporosas y polifenoles estaba asociado con la formación de enlaces de hidrógeno entre el átomo de oxígeno del enlace éter de la resina y el átomo de hidrógeno del grupo hidroxilo fenólico del fenol., La fuerza de interacción de enlace de hidrógeno se vio significativamente afectada por el valor de pH de la solución .
El nitrato de plata es otro soporte sólido útil en la separación de productos naturales. Los productos naturales que contienen los electrones π interactúan reversiblemente con los iones de plata para formar complejos polares. Cuanto mayor sea el número de dobles enlaces o aromaticidad del producto natural, más fuerte se forma la complejación. El nitrato de plata se impregna típicamente en el gel de silicona (SNIS) o alúmina para la separación. Varios grupos de investigación reportaron la separación de ácidos grasos en el SNIS . Wang et al., reportó el aislamiento de zingibereno de la oleorresina de jengibre por cromatografía de columna SNIS . Un par de isómeros, el ácido brasiliensico (83, Fig. 11) y el ácido isobrasiliensico (84), fueron separados de Calophyllum brasiliense por Lemos et al. en una columna de SNIS . Algunos grupos de investigación también aplicaron nitrato de plata en el sistema de dos fases en cromatografía de contracorriente de alta velocidad (HSCCC) para mejorar la separación. Xanthochymol (85) y guttiferone E (86) son un par de isómeros del benzophenone del enlace π de Garcinia xanthochymus por AgNO3-HSCCC., El orden de elución de los isómeros del enlace π en esta separación AgNO3-HSCCC es el enlace π interno (anterior) < terminal, que es idéntico al observado en la cromatografía de columna SNIS .
separación basada en el coeficiente de partición
La cromatografía de partición (PC) sigue el principio de extracción líquido–líquido basado en la solubilidad relativa en dos líquidos inmiscibles diferentes. En la etapa inicial, una fase líquida fue recubierta con una matriz sólida(gel de sílice, carbono, celulosa, etc.) como la fase estacionaria y otra fase líquida se empleó como la fase móvil., La desventaja de una fase estacionaria fácilmente removida y resultados irrepetibles ha llevado a que este tipo de PC se utilice raramente hoy en día. La fase de unión, en la que la fase estacionaria líquida se une químicamente al soporte inerte, que se utiliza como la fase estacionaria supera esos inconvenientes. Alquilo comercialmente disponible como C8 y C18, arilo, Ciano y amino sustituidos silanos se utilizan a menudo como fases Unidas, que son ampliamente utilizados para separar una variedad de productos naturales, especialmente en el paso de purificación final.
tres PTS (notoginsenoside R1 (87) (Fig., 11), ginsenósidos Rg1 (55) (Fig. 8) y Re (88) (Fig. 11)) y dos PDS (Fig. 3) se separaron bien en una columna C18 utilizando el sistema EtOH–H2O como fase móvil . Una nueva fase estacionaria de sílice a base de poliacrilamida fue sintetizada por Cai et al. y se aplicó con éxito en la separación de galactooligosacáridos y saponinas de polifila de París con EtOH-H2O como fase móvil .
La cromatografía contracorriente (CCC) es un tipo de PC que mantiene la fase estacionaria líquida por gravedad o fuerza centrífuga., El CCC rara vez se ha utilizado en etapas tempranas debido a su mala retención estacionaria, largo tiempo de separación y proceso intensivo en mano de obra. CCC fue mejorado significativamente en la década de 1980, sin embargo, cuando ccc moderno, incluyendo HSCCC y cromatografía de partición centrífuga (CPC), se desarrollaron. Los sistemas CCC hidrodinámicos como HSCCC tienen un movimiento de rotación planetaria alrededor de dos ejes giratorios sin sellos giratorios, lo que ofrece un proceso de baja caída de presión. CCC hidrostático, p. ej.,, cromatografía de partición centrífuga, utiliza solo un eje giratorio y tiene una serie de cámaras de interconexión para atrapar la fase estacionaria que ofrece una mayor retención de la fase estacionaria y una presión del sistema más alta que la de HSCCC. La alta presión del sistema en CPC impide la mejora de la resolución al aumentar la longitud de la columna. El CCC de alto rendimiento (HPCCC) representa una nueva generación de CCC hidrodinámico y funciona de la misma manera que el HSCCC, pero con un nivel g mucho más alto., Los instrumentos HPCCC generan más de 240 g, mientras que los primeros equipos HSCCC daban niveles g de menos de 80 g. HPCCC acorta el tiempo de separación a menos de una hora en comparación con varias horas en hsccc anteriores y puede lograr al menos diez veces el rendimiento de un instrumento HSCCC ., En comparación con el método convencional de separación de columnas que utiliza una fase estacionaria sólida, los sistemas CCC hidrostáticos e hidrodinámicos ofrecen algunas ventajas, incluida la eliminación de la adsorción irreversible y el pico de relaves, alta capacidad de carga, alta recuperación de la muestra, riesgo mínimo de desnaturalización de la muestra y bajo consumo de disolventes. La limitación del CCC es que solo separa los compuestos en una ventana de polaridad relativamente estrecha. En los últimos 20 años, HSCCC, HPCCC y CPC atrajeron gran atención en la ciencia de la separación y se han utilizado ampliamente en la separación de productos naturales., Tang et al. se desarrolló un método HSCCC utilizando un sistema de disolvente de dos fases que comprende acetato de etilo-n-butanol-etanol-agua (4:2:1.5:8.5, v/v/v/v) para separar seis glucósidos C-flavona (89-94, Fig. 12), incluyendo dos nuevos compuestos de Lophatherum gracile . HSCCC, HPCCC y CPC también se han aplicado con éxito en la separación de aceite volátil, que es difícil de separar a través de la cromatografía de columna convencional., Seis compuestos volátiles (curdiona (95), curcumol (96), germacrona (97), curzereno (98), 1,8-cineol (99) y β-elemeno (100)) fueron aislados por la CPC a partir del aceite esencial de Curcuma wenyujin utilizando un sistema de solvente no acuoso de dos fases consistente en éter de petróleo-acetonitrilo–acetona (4:3:1 v/v/v) ., Cuatro sesquiterpenoides principales (ar-turmerona (101), α-turmerona (102), β-turmerona (103) y E-atlantona (104)) con estructuras similares se separaron del aceite esencial de Curcuma longa en una sola prueba de HSCCC utilizando un sistema de disolvente de dos fases compuesto por n-heptano-acetato de etilo–acetonitrilo–agua (9.5/0.5/9/1, v / v) y cada compuesto alcanzó más del 98% de pureza . El linalol (105), terpinen-4-ol (106), α-terpineol (107), p-anisaldehído (108), anetol (109) y foeniculin (110) se aislaron con éxito del aceite esencial de Pimpinella anisum mediante HPCCC utilizando una elución gradiente escalonada ., Li et al. se desarrolló un método CPC para la separación del alcohol de pachulí (111) con un sistema solvente éter–acetonitrilo no acuoso (1:1, v/v). Se aislaron más de 2 g de alcohol de pachulí con más del 98% de pureza a partir de 12,5 g de aceite esencial en una columna de 240 ml . La columna de gran volumen (varios litros) se ha adoptado en equipos ccc hidrostáticos comerciales y CCC hidrodinámico para la separación de escala piloto/industrial. Se pudieron obtener pocos informes debido a la confidencialidad comercial. Es difícil juzgar si el CCC hidrostático o hidrodinámico es mejor para aplicaciones industriales., Los usuarios pueden seleccionar diferentes tipos de instrumentos CCC para diferentes propósitos. Cuando la fase estacionaria se retiene mal en CCC hidrodinámico debido a la alta viscosidad y pequeñas diferencias de densidad entre las fases móviles y estacionarias, el CCC hidrostático es más práctico que el CCC hidrodinámico porque la retención de la fase estacionaria del CCC hidrostático es menos sensible a las propiedades físicas de los sistemas líquidos y tendrá una mayor retención de la fase estacionaria., Cuando la fase estacionaria está bien retenida en CCC hidrodinámico, se obtendrá una mayor eficiencia de separación del CCC hidrodinámico que del CCC hidrostático con el mismo sistema líquido y volúmenes de columna similares porque el CCC hidrostático tiene una eficiencia de partición relativamente baja debido a un grado limitado de mezcla, y el sistema hidrodinámico proporciona una mezcla eficiente para producir una alta eficiencia de partición.
estructuras de compuestos 89-111
separación basada en el tamaño molecular
la separación de productos naturales por filtración de membrana (MF) o filtración de gel la cromatografía (GFC) se basa en sus tamaños moleculares.
filtración de membrana (MF)
en MF, la membrana semipermeable permite el paso de moléculas más pequeñas y retiene las moléculas más grandes., MF de productos naturales podría ser caracterizado como microfiltración, ultrafiltración, y nanofiltración basado en el tamaño de poro de la membrana aplicada.
la filtración por membrana ha sido una poderosa herramienta para la concentración, clarificación y eliminación de impurezas en el laboratorio, así como en la industria alimentaria y farmacéutica. El contenido de fenoles totales (338%), ácido clorogénico (66) (Fig. 10) (483%), teobromina (112, Fig., 13) (323%), cafeína (113) (251%), taninos condensados (278%) y saponinas (211%) en el extracto acuoso de Ilex paraguariensis se incrementaron significativamente por nanofiltración . La filtración de membrana de acoplamiento se aplica cuando un solo paso de filtración de membrana no es satisfactorio. Se aplicó una secuencia de microfiltración, ultrafiltración y nanofiltración en el aislamiento de componentes bioactivos del extracto de hoja de olivo. La microfiltración seguida de la ultrafiltración eliminó las impurezas mayores de 5 kDa., La nanofiltración recuperó los polifenoles y flavonoides antioxidantes y antibacterianos, y el contenido del componente principal, oleuropeína (114), en el retentado de nanofiltración se concentró aproximadamente diez veces .
estructuras de compuestos 112-114
cromatografía de filtración de Gel (GFC)
Gel la cromatografía de filtración también se conoce como cromatografía de permeación de gel o cromatografía de exclusión de tamaño., Las moléculas pequeñas tienen un tiempo de retención más largo en GFC que las moléculas grandes.
El Sephadex está formado por dextrano reticulado, y los tipos G de Sephadex se utilizaron para la separación de compuestos hidrofílicos como péptidos , oligosacáridos y polisacáridos .
Sephadex Lh20, un derivado hidroxipropilado de Sephadex G25, tiene naturalezas hidrofóbicas e hidrofílicas. Un mecanismo de adsorción también estuvo involucrado en la separación usando Sephadex LH-20. Sephadex LH-20 se puede utilizar para la separación de una amplia variedad de productos naturales en un sistema solvente acuoso o no acuoso., Los oligosacáridos feruloilados de arabinoxilano del trigo intermedio de grano de cereal perenne fueron bien separados por Sephadex LH-20 utilizando 100% agua como fase móvil . Tres nuevos diterpenos de pirimidina, axistatinas 1-3 (115-117, Fig. 14) junto con tres formamidas conocidas (118-120) se aislaron de la fracción activa anticancerosa CH2Cl2 de Agelas axifera sobre columnas Sephadex LH-20 con una serie de sistemas de solventes , seguidos de purificación utilizando Prep-HPLC .
las Estructuras de los compuestos 115-120
de Poliacrilamida (bio-gel P) y reticulado de agarosa también fueron utilizados en la separación de productos naturales.
separación basada en la fuerza iónica
la cromatografía de intercambio iónico (IEC) separa moléculas basadas en las diferencias en su carga superficial neta. Algunos productos naturales, como alcaloides y ácidos orgánicos que poseen un grupo funcional capaz de ionización, podrían ser separados por IEC., Las moléculas cargadas podrían ser capturadas y liberadas por la resina de intercambio iónico cambiando la fuerza iónica de la fase móvil (por ejemplo, cambiando el pH o la concentración de sal). Las resinas de intercambio iónico de cationes se utilizaron para la separación de alcaloides, mientras que las resinas de intercambio iónico de aniones se utilizaron para la separación de ácidos orgánicos naturales y fenoles.
las antocianinas cargadas positivamente se separaron de los compuestos polifenólicos neutros en el extracto de fruta Actinidia melanandra (kiwi) tratado con XAD-7 utilizando resina de intercambio iónico catiónico dowex 50WX8 ., Feng y Zhao utilizaron cromatografía semi-preparativa para separar (-) epigalocatequina −galato y (-) epicatequina-galato (122) en extracto crudo de té con gel débilmente ácido CM-Sephadex C-25 a base de polisacáridos . Un nuevo alcaloide, fumonisina B6 (123), junto con un alcaloide conocido, fumonisina B2 (124), fue aislado por IEC sobre estratos x-C resina de intercambio de cationes RP de modo mixto seguida de cromatografía de fase inversa del hongo Aspergillus niger nrrl 326 cultures extract .
estructuras de compuestos 121-124
otras técnicas modernas de separación
destilación Molecular (MD)
la destilación molecular separa el Molecular por destilación al vacío a una temperatura muy por debajo de su punto de ebullición. Es un método de destilación adecuado para separar compuestos termosensibles y de alto peso molecular. Borgarello et al. se obtuvo un timol (125, Fig., 16) fracción de enriquecimiento del aceite esencial de orégano por destilación molecular modelada por redes neuronales artificiales. La fracción obtenida tenía propiedades antioxidantes y podía estabilizar el aceite de girasol . Se eliminaron efectivamente tres tipos de ftalatos del aceite de naranja dulce mediante destilación molecular en las condiciones óptimas (temperatura de evaporación de 50 °C, Presión del evaporador de 5 kPa y un caudal de alimentación de 0,75 ml/min) .
estructura de compuestos 125
cromatografía de gases preparativa (Prep-GC)
Gas la cromatografía (GC) con alta eficiencia de separación y separación y análisis rápidos lo convierte potencialmente en el método preparativo ideal para la separación de compuestos volátiles. El puerto de inyección, la columna, el dispositivo de división y el dispositivo de trampa del equipo GC deben modificarse para la separación preparatoria debido a la falta de PrEP-GC comercial .
cinco compuestos volátiles, a saber, curzereno (98) (6.,6 mg), β-elemene (100, Fig. 12) (5,1 mg), curzerenona (126) (41,6 mg), curcumenol (127) (46,2 mg) y curcumenona (128) (21,2 mg) (Fig. 17), se separaron del extracto metanol del rizoma de cúrcuma mediante Prep-GC sobre una columna de acero inoxidable envasada con OV-101 al 10% (3 m × 6 mm, i.d.) después de 83 inyecciones únicas (20 µl). Prep-GC también se aplicó para la separación de isómeros naturales. Se obtuvieron un total de 178 mg de cis-asarona (129) y 82 mg de trans-asarona (130) del aceite esencial de Acorus tatarinowii después de 90 inyecciones únicas (5 µl) en la misma columna que la anterior ., Prep-GC se ha convertido en un método de separación importante para los compuestos volátiles naturales; sin embargo, una carga de muestra más pesada y la columna preparativa de gran diámetro empleada disminuyeron la eficiencia . Mientras tanto, las desventajas de Prep-GC, incluida la falta de equipos comerciales de Prep-GC, el consumo de un gran volumen de gas portador, la descomposición de compuestos termolábiles a altas temperaturas de operación, las dificultades de recolección de fracciones y la baja producción, todavía restringen el uso de Prep-GC.
las Estructuras de los compuestos 126-130
cromatografía de fluidos Supercríticos (SFC)
SFC utiliza con fluidos supercríticos como la fase móvil. SFC integra las ventajas de GC y cromatografía líquida (LC) ya que los fluidos supercríticos poseen propiedades de alta capacidad de disolución, alta difusividad y baja viscosidad, lo que permite una separación rápida y eficiente., Por lo tanto, SFC puede utilizar una columna más larga y partículas más pequeñas de la fase estacionaria que la HPLC, lo que proporciona un mayor número de placas teóricas y una mejor separación. El SFC puede utilizarse para la separación de compuestos no volátiles o termolábiles a los que no se aplica el GC. Los sistemas SFC son compatibles con una amplia gama de detectores diferentes, incluidos los utilizados en sistemas LC y GC., La polaridad de la fase móvil ampliamente utilizada, S-CO2, en SFC está cerca de la polaridad del hexano, con el resultado de que SFC se utilizó para la separación de productos naturales no polares como ácidos grasos, terpenos y aceites esenciales durante muchos años. Los modificadores de eluyentes como el metanol y el acetonitrilo mejoran la resistencia a la elución, lo que aumenta el interés en separar los productos naturales polares por SFC .
Zhao et al. separaron con éxito tres pares de 25 r / s de saponinas diastereoméricas de espirostanol (131-136, Fig., 18) del Semen TCM Trigonellae (la semilla de Trigonella foenum-graecum) en dos columnas CHIRALPAK IC acopladas en tándem . Yang et al. se aplicó SFC para la separación preparativa de dos pares de alcaloides 7-epiméricos de espiro oxindol (137-140) de tallos con ganchos de Uncaria macrophylla (una fuente de hierbas para TCM Uncariae Ramulus Cum Uncis) en una columna viridis Prep Silica 2-EP OBD utilizando acetonitrilo que contiene 0.2% DEA modificado S-CO2. La fase móvil no acuosa usada en SFC previno la tautomerización de los alcaloides oxindol de spiro separados ., SFC también se aplica en la separación de enantiómeros naturales. (R,S)-goitrin (141-142) es el ingrediente activo de TCM Isatidis Radix. La separación quiral de (R) y (S) bocitrinas se logró con éxito mediante prep-SFC en una columna de Chiralpak IC utilizando acetonitrilo como modificador orgánico .
estructuras de compuestos 131-142
tecnología de impresión Molecular
tecnología de impresión Molecular ha sido un método de separación atractivo en la última década debido a sus características únicas, que incluyen alta selectividad, bajo costo y fácil preparación. Muchas cavidades complementarias con la memoria del tamaño, la forma y los grupos funcionales de las moléculas de la plantilla se generan cuando las moléculas de la plantilla se eliminan del polímero impreso molecular (MIP)., Por lo tanto, la molécula plantilla y sus análogos tendrán el reconocimiento específico y la adsorción selectiva para el MIP. Los MIP se han utilizado ampliamente en la separación de productos naturales o como sorbentes de extracción en fase sólida para la preparación de muestras de materiales herbales para enriquecer los compuestos menores.
Ji et al. se desarrollaron polímeros multi-plantilla impresos molecularmente utilizando DL-tirosina y ácido fenilpiruvico como moléculas plantilla para separar la denciquina (143, Fig. 19) del extracto de agua de Panax notoginseng., Tanto la denciquina como la molécula plantilla de DL-tirosina (144) contienen un grupo amino (NH2) y un grupo de ácido carboxílico (COOH), y la otra molécula plantilla, el ácido fenilpiruvico (145), tiene un grupo de ácido α-ceto (COCOOH) que también se puede encontrar en la estructura de la denciquina . Ma et al. se desarrolló un método de separación preparativa para separar el solanesol (146) de las hojas de tabaco mediante cromatografía flash basada en MIP., El MIP se preparó con metacrilato de metilo como monómero, solanesol como molécula modelo y dimetacrilato de etilenglicol como reticulante mediante un método de polimerización en suspensión. Se separó un total de 370,8 mg de solanesol con 98,4% de pureza del extracto de hojas de tabaco con un rendimiento de 2,5% del peso seco de las hojas de tabaco . Et al. se utilizó el MIP magnético termo-sensible para separar los tres curcuminoides principales, curcumina (147), demetoxicurcumina (148) y bisdemetoxicurcumina (149), del rizoma TCM Curcumae Longae (el rizoma de Curcuma longa)., El MIP magnético termo-responsivo diseñado mostró un buen factor de impresión para curcuminoides en un rango entre 2.4 y 3.1, termo-responsivo y separación magnética rápida (5 s) .
estructuras de compuestos 143-149
cromatografía simulada del lecho móvil
SMB) la cromatografía utiliza múltiples columnas con fases estacionarias (bed)., El movimiento a contracorriente del lecho se simula a través de válvulas rotativas, que cambian periódicamente la entrada (alimentación y eluyente) y la salida (extracción y refinado). El proceso SMB es un método de separación continua y una poderosa herramienta para la separación a gran escala de productos naturales con la ventaja de un menor consumo de disolventes en un período de tiempo más corto.
dos ciclopéptidos, ciclolinopéptidos C y E (150-151, Fig., 20), se obtuvieron a partir de aceite de linaza utilizando un SMBC de tres zonas con ocho columnas de gel de sílice esférico de fase normal de HPLC preparativo y utilizando etanol absoluto como desorbente . Kang et al. se desarrolló un proceso SMB en tándem consistente en dos unidades SMB de cuatro zonas en una serie con los mismos tamaños de partículas adsorbentes en el anillo I y el anillo II para separar el paclitaxel (taxol, 74) (Fig. 11), 13-dehidroxibaccatina III (152), y 10-deacetilpaclitaxel (153). El Paclitaxel se recuperó en la primera unidad SMB, mientras que la 13-dehidroxibaccatina III y el 10-deacetilpaclitaxel se separaron en la segunda unidad SMB ., Mun mejoró este método de cromatografía SMB mediante el uso de diferentes tamaños de partículas adsorbentes en el anillo I y el anillo II . Los fluidos supercríticos también se pueden usar como desorbentes en la cromatografía SMB. Liang et al. se aplicó con éxito dióxido de carbono supercrítico con etanol como desorbente para que una SMB de tres zonas separara el resveratrol (60) (Fig. 9)y emodin (44) (Fig. 4) de un extracto crudo de la MTC Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix .
estructuras de compuestos 150-153
separación cromatográfica multidimensional
los componentes el extracto sometido a separación era complejo, y generalmente, ningún compuesto puro será separado en una cromatografía de la columna. La separación multidimensional basada en la extracción en fase sólida y el acoplamiento de múltiples columnas con diferentes fases estacionarias mejora en gran medida la eficiencia de separación., Con la entrada en el mercado de equipos de separación dimensional múltiple más comerciales, la separación de productos naturales se está volviendo más rápida, eficiente y automatizada.
las Estructuras de los compuestos 154-167