a komponensek A kivonat a fenti módszerek komplex tartalmazza a különböző természetes termékek, amelyek a további szétválasztása, tisztítása megszerezni az aktív frakció, vagy a tiszta, természetes termék. Az elválasztás az egyes természetes termékek fizikai vagy kémiai különbségétől függ., A kromatográfia, különösen az oszlopkromatográfia a fő módszer a tiszta természetes termékek komplex keverékből történő előállítására.
Szétválasztás alapján adszorpciós tulajdonságai
Adszorpciós kromatográfiás oszlop széles körben használják a szétválasztás a természetes termékek, különösen a kezdeti szétválasztás színpadon, egyszerűsége miatt, nagy kapacitású, valamint az alacsony költség adszorbensek pl. szilikagél, valamint macroporous gyanták. Az elválasztás a természetes termékek adszorpciós affinitása közötti különbségeken alapul az adszorbensek felületén., A kiválasztás adszorbensek (állófázis), valamint a mobil fázis elengedhetetlen ahhoz, hogy jó szétválasztása természetes termékek, maximalizálja a hasznosítási cél vegyületek elkerülni a irreverzibilis adszorpció a megcélzott vegyületek rá a adszorbensek.
a szilikagél a legszélesebb körben használt adszorbens a fitokémiai vizsgálatban. Becslések szerint a fitokémiai elválasztás (preparatív skála) közel 90% – a szilikagélen alapult. A szilikagél poláris abszorbens szilanolcsoportokkal. A molekulákat a szilikagél hidrogénkötések és dipól–dipól kölcsönhatások révén tartja meg., Így a poláris természetes termékek hosszabb ideig maradnak szilikagél oszlopokban, mint a nem poláris termékek. Néha bizonyos poláris természetes termékek visszafordíthatatlan kémiai felszívódáson mennek keresztül. A szilikagél deaktiválása víz hozzáadásával használat előtt vagy víztartalmú mobil fázis használatával gyengíti az adszorpciót. Az alkaloidok szilikagélen történő elválasztásakor súlyos követés fordulhat elő, és kis mennyiségű ammónia vagy szerves amin, például trietilamin hozzáadása csökkentheti a követést., Tizenkét alkaloidok tartozó metil-chanofrutikozinát csoport, beleértve hat új alkaloidok, prunifolinok A-F (68-73, ábra. 11), a Kopsia arborea leveléből a kezdeti szilikagél oszlopkromatográfiával nyerték, a MeOH–CHCl3 gradiens alkalmazásával, mint mozgó fázist, amelyet eluentként centrifugális TLC követ ammóniával telített Et2O-hexánnal vagy EtOAc / hexán rendszerekkel.
68-88
alumínium-oxid (alumínium-oxid) erős poláris adszorbens, amelyet a természetes termékek szétválasztására használnak, különösen az alkaloidok elválasztásában. Az Al3 + erős pozitív területe, valamint az alumínium-oxid alapterületei, amelyek befolyásolják a könnyen polarizált vegyületeket, az alumínium-oxid adszorpciójához vezetnek, amely különbözik a szilikagéltől., Az alumínium-oxid alkalmazása a természetes termékek elválasztásában jelentősen csökkent az elmúlt években, mivel katalizálja a kiszáradást, a bomlást vagy az izomerizációt az elválasztás során. Zhang és Su egy kromatográfiás protokollt jelentett be az alapvető alumínium-oxid felhasználásával a taxol elválasztására (74, ábra. 11) A Taxus cuspidate callus kultúrák kivonatából kiderült, hogy a taxol visszanyerése több mint 160% volt. Megállapították, hogy a taxol növekedése az alumínium-oxid által katalizált 7-epi-taxol (75) izomerizációjából származik., Azt is megállapították, hogy egy kis mennyiségű taxol lehet bontani baccatin III (76) és 10-deacetilbaccatin III (77) az alumínium-oxid oszlopban . A taxol savas, semleges és bázikus alumínium-oxidra történő szétválasztásának további vizsgálata azt mutatta, hogy a Lewis souci és az alumínium-oxid felszínén található bázikus aktivitási magok a 7-epi-taxol taxolra történő izomerizációját indukálták .
a kromatográfiában használt poliamidok szerkezete akril-és amidcsoportokat is tartalmaz., Hidrofób és / vagy hidrogénkötvény kölcsönhatás lép fel a poliamid oszlop kromatográfiájában a mobil fázis összetételétől függően. Amikor poláris oldószereket, például vizes oldószereket használnak mobil fázisként, a poliamidok nem poláris álló fázisként működnek, a kromatográfiás viselkedés hasonló a fordított fázisú kromatográfiához. Ezzel szemben a poliamidok poláris stacionárius fázisként működnek, a kromatográfiás viselkedés hasonló a normál fáziskromatográfiához., Poliamid kromatográfiás oszlop egy hagyományos eszköz a különválás természetes polifenol beleértve anthraquinones, fenolos savak, flavonoidok, akinek a mechanizmusok tulajdonított hidrogén kötelék kialakulását között poliamid abszorbensek, mobil fázis cél vegyületek. Gao et al. tanulmányozta a polifenolok kromatográfiás viselkedését, beleértve a fenolsavakat és a flavonoidokat a poliamid oszlopon. Megállapítást nyert, hogy a poliamid hidrogénkötési akceptorként működött, és a fenolos hidroxilok száma és a molekulában betöltött pozíciójuk befolyásolta az adszorpció erősségét ., A polifenolok mellett más típusú természetes termékek poliamid oszlopkromatográfiával történő elválasztásáról is beszámoltak. A Kuqingcha teljes szaponinjait poliamid oszlopkromatográfiával lehet dúsítani, ami jelentősen csökkentette az SHR rat szisztolés nyomását . Diklór-metán és metanol eluensként gradiensben történő keverékével a hét fő izokinolin alkaloid A Koptidis rizómában, beleértve a berberint (39), a koptizint (40), a palmatint (41), a jatrorrhizint (42), a columbamint (78), a groenlandicint (79) (ábra. 4), és magnoflorin (80, ábra., 11) egylépcsős poliamid oszlopkromatográfiában elválasztottuk .
az adszorpciós makroporózus gyanták makroporózus szerkezetű polimer adszorbensek, de ioncserélő csoportok nélkül, amelyek szinte bármilyen típusú természetes terméket szelektíven adszorbeálhatnak. Ők már széles körben használt vagy, mint egy önálló rendszer részeként vagy egy előkezelés folyamat eltávolítja a szennyeződéseket, vagy gazdagító cél vegyületek miatt az előnyök, amelyek magukban foglalják a magas adsorptive kapacitás, viszonylag olcsó, egyszerű, regeneráló, könnyen skála-fel., Az adszorpciós makroporózus gyanták adszorpciós mechanizmusai közé tartoznak az elektrosztatikus erők, a hidrogénkötés, a komplex képződés és a gyanták és az oldatban lévő természetes termékek közötti méretszitálás. A gyanták kapacitását befolyásoló legfontosabb tényezők a felület, a pórusátmérő és a polaritás . 20 (S)-protopanaxatriol szaponinok (PTS) (81) és 20 (S)-protopanaxadiol szaponinok (PDS) (82, ábra. 11) a Panax notoginseng gyökerében két fő bioaktív komponensként ismertek., A PTS-t és a PDS-t 30, illetve 80% – os (v/v) vizes etanol-oldatokkal sikeresen elválasztották a D101 makroporózus gyantaoszloptól. A PDS és PTS kromatográfiás viselkedése közel állt a fordított fázisú kromatográfiához, amikor a makroporózus gyantaoszlop-kromatográfia kromatográfiás profiljait összehasonlították a ZORBAX SB-C18 oszlop HPLC kromatogramjával . Nemrég, Meng et al. a Panacis Japonici Rhizoma (PJRS) teljes szaponinjait D101 makroporózus gyantával nyerték., A négy fő szaponin, a chikusetsusaponins v (55), a IV (56) és az IVa (57), valamint a pseudoginsenoside RT1 (58) tartalma (ábra. 8), a kapott PJR – kben több mint 73% volt. A PJR-k a Panacis Japonici Rhizoma minőségellenőrzésének standard referenciájaként szolgáltak . Egyes kutatók azt feltételezték, hogy a makroporózus gyanták és a polifenolok közötti fő adszorpciós mechanizmus a gyanta éter-kötésének oxigénatomja és a fenol fenol hidroxilcsoportjának hidrogénatomja közötti hidrogénkötéshez kapcsolódik., A hidrogénkötési kölcsönhatási erőt jelentősen befolyásolta az oldat pH-értéke .
Az ezüst-nitrát egy másik hasznos szilárd támogatás a természetes termékek elválasztásában. Azok a természetes termékek, amelyek a π elektronokat tartalmazzák, visszafordíthatatlanul kölcsönhatásba lépnek az ezüstionokkal, hogy poláris komplexeket képezzenek. Minél nagyobb a kettős kötések száma vagy a természetes termék aromaticitása,annál erősebb a komplexáció. Az ezüst-nitrátot jellemzően szilikagélen (SNIS) vagy alumínium-oxidon impregnálják elválasztásra. Számos kutatócsoport számolt be a zsírsavak SNIS-re történő elválasztásáról . Wang et al., jelentett izolálása zingiberene gyömbér oleoresin által SNIS oszlop kromatográfia . Egy pár izomerek, brasiliensic sav (83, ábra. 11) és izobrazilénsav (84), a calophyllum brasiliense-től a Lemos et al. egy SNIS oszlopon . Egyes kutatócsoportok ezüst-nitrátot is alkalmaztak a kétfázisú rendszerben nagy sebességű ellenáramú kromatográfiában (HSCCC) az elválasztás javítása érdekében. A Xanthochymol (85) és a Guttiferone E (86)az AgNO3-HSCCC által alkotott π bond benzofenon izomerek párja., A π kötés izomerek elúciós sorrendje ebben az AgNO3-HSCCC elválasztásban a belső π kötés (korábbi) < terminál, amely megegyezik a SNIS oszlop kromatográfiájával.
elválasztás a
Partíciókromatográfia (PC) alapján a folyadék–folyadék extrakciós elvet követi, amely két különböző folyadékban való relatív oldhatóságon alapul. A korai szakaszban egy folyékony fázist szilárd mátrixra (szilikagél, szén, cellulóz stb.)) mozgó fázisként a helyhez kötött fázist és egy másik folyékony fázist alkalmazták., A könnyen eltávolítható stacionárius fázis és a megismételhetetlen eredmények hátránya ahhoz vezetett, hogy manapság ritkán használják ezt a PC-t. A ragasztott fázis, amelyben a folyékony álló fázis kémiailag kötődik az inert tartóhoz, amelyet helyhez kötött fázisként használnak, legyőzi ezeket a hátrányokat. A kereskedelemben kapható alkil, mint a C8 és C18, aril, Ciano és amino szubsztituált szilánok gyakran használják ragasztott fázisok, amelyek széles körben használják, hogy külön a különböző természetes termékek, különösen a végső tisztítási lépés.
három PTS (notoginsenoside R1 (87) (ábra., 11), ginsenosides Rg1 (55) (ábra. 8) És Re (88) (ábra. 11)) és két PD (ábra. 3) egy C18 oszlopban jól elkülönítették az EtOH–H2O rendszert mobil fázisként . Egy új poliakrilamid-alapú szilícium-dioxid-álló fázist szintetizált Cai et al. sikeresen alkalmazták a párizsi polyphylla galaktooligoszacharidjainak és szaponinjainak az EtOH–H2O-val való elválasztásakor, mint mobil fázist .
az ellenáramú kromatográfia (CCC) olyan PC, amely gravitációs vagy centrifugális erővel tartja a folyékony álló fázist., A CCC-t ritkán alkalmazták korai stádiumban a gyenge helyhez kötött visszatartás, a hosszú elválasztási idő és a munkaigényes folyamat miatt. A CCC jelentősen javult az 1980-as években, azonban, amikor a modern CCC-t, beleértve a hsccc-t és a centrifugális partíciókromatográfiát (CPC), kifejlesztették. A hidrodinamikus CCC rendszerek, mint például a HSCCC, bolygókerekes forgási mozgással rendelkeznek két forgó tengely körül, forgó tömítések nélkül, ami alacsony nyomású leesési folyamatot kínál. Hidrosztatikus CCC, pl., centrifugális megoszlási kromatográfia, felhasználása csak a forgó tengely, valamint egy sor egymásba nyíló chambers, hogy csapda az állófázis mely egy magasabb visszatartás az állófázis egy magasabb rendszer nyomás, mint HSCCC. A CPC magas rendszernyomása megakadályozza a felbontás javulását az oszlop hosszának növelésével. A nagy teljesítményű CCC (HPCCC) a hidrodinamikus CCC új generációját képviseli, ugyanúgy működik, mint a HSCCC, de sokkal magasabb g-szinttel., A HPCCC eszközök generál több mint 240 g, míg a korai hsccc berendezés adta g-szint kevesebb, mint 80 g. HPCCC lerövidíti az elválasztási idő kevesebb, mint egy óra képest több órán át a korábbi HSCCC és elérheti legalább tízszerese a teljesítmény egy hsccc eszköz ., Összehasonlítva a hagyományos oszlop szeparációs módszer szilárd állófázis, mind a hidrosztatikus pedig hidrodinamikai CCC rendszerek kínálnak néhány előnye, beleértve a megszüntetése irreverzibilis adszorpció, illetve csúcs követi, nagy terhelési kapacitású, magas minta helyreállítási, minimális a kockázata a minta denaturáció alacsony oldószer felhasználás. A CCC korlátozása az, hogy csak viszonylag keskeny polaritású ablakban választja el a vegyületeket. Az elmúlt 20 évben a hsccc, a HPCCC és a CPC nagy figyelmet fordított a szétválasztás tudományára, és széles körben alkalmazták a természetes termékek szétválasztásában., Tang et al. kifejlesztett egy hsccc módszert egy kétfázisú oldószerrendszer segítségével, amely etil–acetát-n–butanol–etanol-vizet tartalmaz (4:2:1.5:8.5, v/v/v/v) hat flavon C-glikozid elválasztására (89-94, ábra). 12), beleértve a Lophatherum gracile két új vegyületét . A hsccc-t, a HPCCC-t és a CPC-t szintén sikeresen alkalmazták az illékony olaj szétválasztásában, amelyet a hagyományos oszlopkromatográfiával nehéz elválasztani., Hat Illékony vegyületet (kurdion (95), kurkumol (96), germakron (97), kurzerén (98), 1,8-cineol (99) és β-elemén (100))) izoláltak CPC-vel a kurkuma wenyujin illóolajából, kőolaj–éter–acetonitril-acetonból (4:3:1 v/v/v) álló kétfázisú oldószerrendszer alkalmazásával ., Négy nagy szeszkviterpenoidot (ar-turmeron (101), α-turmeron (102), β-turmeron (103) és e-atlanton (104) hasonló szerkezetű, egyetlen HSCCC-rendszerben, n-Heptán–etil–acetát–acetonitril-vízből álló kétfázisú oldószerrendszerrel (n-Heptán-etil-acetát-acetonitril-víz) elválasztottak a Curcuma longa illóolajától (102). 9.5/0.5/9/1, v/v) és mindegyik vegyület 98% – os tisztaságú volt . A Linalool (105), a terpinen-4-ol (106), az α-terpineol (107), A P-anizaldehid (108), az anetol (109) és a foenikulin (110) a HPCCC által sikeresen izolált Pimpinella anisum illóolajból lépésenkénti gradiens elúcióval ., Li et al. kifejlesztett egy CPC módszert a pacsuli–alkohol (111) elválasztására egy nem akvén éter-acetonitril (1:1, v/v) oldószerrendszerrel. Több mint 2 g 98% – os tisztaságú pacsuli-alkoholt izoláltak 12,5 g illóolaj-ból egy 240 ml-es oszlopon . A nagy térfogatú (több liter) oszlopot kereskedelmi hidrosztatikus CCC-ben és hidrodinamikus CCC-berendezésekben fogadták el a kísérleti / ipari méretarányú elválasztáshoz. Kevés jelentést lehetett beszerezni a kereskedelmi titoktartás miatt. Nehéz megítélni, hogy a hidrosztatikus vagy hidrodinamikus CCC jobb-e az ipari alkalmazásokhoz., A felhasználók különböző típusú CCC eszközt választhatnak különböző célokra. Ha az állófázis rosszul megtartott a hidrodinamikai CCC miatt magas viszkozitású, valamint a kis sűrűség különbség a mobil, illetve az álló fázis, a hidrosztatikus CCC több gyakorlati, mint hidrodinamikai CCC, mert a retenciós az állófázis a hidrosztatikus CCC kevésbé érzékeny a fizikai tulajdonságok folyadék rendszerek magasabb visszatartás az állófázis., Ha az állófázis jól megtartotta a hidrodinamikai CCC, magasabb elválasztás hatékonysága is kapott a hidrodinamikai CCC, mint a hidrosztatikus CCC ugyanazzal a folyékony rendszer hasonló oszlop kötetek, mert hidrosztatikus CCC viszonylag alacsony partíció hatékonyság miatt korlátozott mértékű keveredés, a hidrodinamikai rendszer biztosítja a hatékony keverés hozam magas partíció hatékonyságát.
89-111
elválasztás a molekuláris méret alapján
a természetes termékek szétválasztása a membránszűrés (MF) vagy a gélszűrő kromatográfia (GFC) molekuláris méretükön alapul.
membránszűrés (MF)
az MF-ben a féligáteresztő membrán lehetővé teszi a kisebb molekulák áthaladását és megtartja a nagyobb molekulákat., A természetes termékek MF-jét az alkalmazott membrán pórusmérete alapján mikroszűrésként, ultraszűrésként és nanoszűrésként lehet jellemezni.
A membránszűrés hatékony eszköz volt a szennyeződések koncentrálására, tisztítására és eltávolítására a laborban, valamint az élelmiszer-és gyógyszeriparban. A teljes fenolok (338%), klorogénsav (66) tartalma (ábra. 10) (483%), teobromin (112, ábra., 13) (323%), az Ilex paraguariensis vizes kivonatában a koffein (113) (251%), a sűrített tanninok (278%) és a szaponinok (211%) jelentősen megnövekedtek a nanofiltrációval . A csatlakozó membránszűrést akkor alkalmazzák, ha egyetlen membránszűrési lépés nem kielégítő. A bioaktív komponensek olajfalevél-kivonatból történő izolálása során mikroszűrés, ultraszűrés és nanoszűrés sorozatát alkalmazták. A mikrofiltráció, amelyet ultraszűrés követ, eltávolította az 5 kDa-nál nagyobb szennyeződéseket., A nanofiltráció során az antioxidáns és antibakteriális polifenolokat és flavonoidokat, a fő összetevő, az oleuropein (114) tartalmát pedig a nanofiltrációs retentátban körülbelül tízszer koncentrálták .
Struktúrák vegyületek 112-114
Gél szűrés kromatográfia (GFC)
Gél szűrés kromatográfia is ismert, mint gélkromatográfiás vagy méret kizárás kromatográfia., A kis molekulák hosszabb retenciós idővel rendelkeznek a GFC-ben, mint a nagy molekulák.
a Sephadexet keresztkötéses dextrán alkotja , és a sephadex g-típusait hidrofil vegyületek, például peptidek, oligoszacharidok és poliszacharidok elválasztására használták .
a Sephadex Lh20, a Sephadex G25 hidroxipropilált származéka mind hidrofób, mind hidrofil jellegű. Egy adszorpciós mechanizmus is részt vett a sephadex LH-20 alkalmazásával történő elválasztásban. A Sephadex LH-20 a természetes termékek széles választékának elválasztására használható vizes vagy nem vizes oldószeres rendszerben., Az évelő gabonaszemek középbúza arabinoxilán oligoszacharidjait jól elkülönítette a Sephadex LH-20, 100% – os víz felhasználásával, mint mozgó fázist . Három új pirimidin-diterpének, axisztatinok 1-3 (115-117, ábra. 14) három ismert formamiddal (118-120) együtt izoláltuk az Agelas axifera rákellenes aktív CH2Cl2 frakciójából a Sephadex LH-20 oszlopokon , oldószerrendszerek sorozatával, majd Prep-HPLC-vel történő tisztítással .
115-120
poliakrilamid (bio-gel P) és keresztkötésű agaróz is a természetes termékek elválasztására használják.
Ionos szilárdságon alapuló elválasztás
az ioncserélő kromatográfia (IEC) a molekulákat a nettó felületi töltésük különbségei alapján választja el. Egyes természetes termékek, mint például az alkaloidok és az ionizációra képes funkcionális csoporttal rendelkező szerves savak IEC-vel elválaszthatók., A töltött molekulákat ioncserélő gyantával lehet megfogni és felszabadítani a mozgó fázis Ionos szilárdságának megváltoztatásával (pl. a pH vagy a sókoncentráció megváltoztatásával). Az alkaloidok szétválasztására kationion-ioncserélő gyantákat, míg az anion-ioncserélő gyantákat természetes szerves savak és fenolok szétválasztására használták.
a pozitív töltésű antocianinokat a xad-7-gyel kezelt Actinidia melanandra gyümölcs (Kivi) kivonat semleges polifenolvegyületeitől Dowex 50wx8 kation ioncserélő gyantával választottuk el ., Feng és Zhao félpreparatív kromatográfiát használt a (−)epigallokatechin-gallát és (−)epicatechin-gallát (122) elválasztására poliszacharid alapú gyengén savas géllel, CM-Sephadex C-25 . Egy új alkaloid, fumonisin B6 (123), valamint egy ismert alkaloid, fumonisin B2 (124), volt elszigetelt által IEC át Rétegek X-C vegyes módú RP-kationcserélő gyanta követi fordított fázisú kromatográfia a gomba az Aspergillus niger NRRL 326 kultúrák kivonat .
121-124
egyéb modern elválasztási technikák
molekuláris desztilláció (MD)
/ h4 >
a molekuláris desztilláció vákuumos desztillációval választja el a molekulát a forráspont alatti hőmérsékleten. Megfelelő desztillációs módszer a hőérzékeny és nagy molekulatömegű vegyületek elválasztására. Borgarello et al. kapott egy timolt (125, ábra., 16) oregánó illóolaj dúsítási frakciója mesterséges neurális hálózatok által modellezett molekuláris desztillációval. A kapott frakció antioxidáns tulajdonságokkal rendelkezik, stabilizálhatja a napraforgóolajat . Háromféle ftalátot hatékonyan távolítottak el az édes narancsolajból molekuláris desztillációval optimális körülmények között (50 °C-os párolgási hőmérséklet, 5 kPa párologtató nyomás és 0,75 ml/perc betáplálási sebesség) .
Szerkezetű vegyületek 125
Biztos gázkromatográfia (Prep-GC)
gázkromatográfia (GC) a magas elválasztás hatékonysága gyorsan különválás, elemzés teszi, hogy potenciálisan az ideális biztos módszer a különválás az illékony vegyületek. A GC berendezések befecskendező portját, oszlopát, osztott eszközét és csapdaeszközét a kereskedelmi Prep-GC hiánya miatt a preparatív elválasztáshoz módosítani kell .
öt illékony vegyület, nevezetesen a kurzerén (98) (6.,6 mg), β-elemén (100, ábra. 12) (5,1 mg), kurzerenon (126) (41,6 mg), kurkumenol (127) (46,2 mg) és kurkumenon (128) (21,2 mg) (ábra. 17), elválasztjuk a metanol kivonat kurkuma rizóma Prep-GC egy rozsdamentes acél oszlop tele 10% OV-101 (3 m × 6 mm, I.d.) után 83 egyetlen injekció (20 µl) . A PrEP-GC-t a természetes izomerek elválasztására is alkalmazták. Összesen 178 mg cisz-aszaront (129) és 82 mg transz-aszaront (130) nyertek az Acorus tatarinowii illóolajából 90 egyszeri injekció (5 µl) után a fenti oszlopon ., A Prep-GC fontos elválasztási módszerré vált a természetes illékony vegyületek számára, azonban a nehezebb mintaterhelés és az alkalmazott nagy átmérőjű preparatív oszlop csökkentette a hatékonyságot . Eközben a PrEP-GC hátrányai, beleértve a kereskedelmi Prep-GC berendezések hiányát, a nagy mennyiségű hordozógáz fogyasztását, a termolabil vegyületek nagy üzemi hőmérsékleten történő bomlását, a frakciógyűjtés nehézségeit és az alacsony termelést, továbbra is korlátozzák a Prep-GC használatát.
126-130
szuperkritikus folyadékkromatográfia (SFC)
az sfc szuperkritikus folyadékot használ mobil fázisként. Az SFC integrálja mind a GC, mind a folyadékkromatográfia (LC) előnyeit, mivel a szuperkritikus folyadékok nagy oldódási képességgel, nagy diffúzióval és alacsony viszkozitással rendelkeznek, ami lehetővé teszi a gyors és hatékony elválasztást., Így az SFC hosszabb oszlopot és kisebb részecskéket használhat az álló fázisból, mint a HPLC, ami nagyobb számú elméleti lemezt és jobb elválasztást biztosít. Az SFC nem illékony vagy termikusan labilis vegyületek elválasztására használható, amelyekre a GC nem alkalmazható. Az SFC rendszerek számos különböző detektorral kompatibilisek, beleértve az LC és GC rendszerekben használt detektorokat is., A széles körben használt mobil fázis, az S-CO2 polaritása az SFC-ben közel áll a hexán polaritásához, aminek következtében az SFC-t évek óta nem poláris természetes termékek, például zsírsavak, terpének és illóolajok elválasztására használták. Az Eluent módosítók, mint például a metanol és az acetonitril fokozzák az elúciós szilárdságot, ami növeli az érdeklődést a poláris természetes termékek SFC általi elválasztása iránt .
Zhao et al. sikeresen elválasztott három pár 25 R / S diastereomer spirosztanol szaponint(131-136, ábra., 18) a TCM Trigonellae spermából (a Trigonella foenum-graecum magjából) két CHIRALPAK IC oszlopon, párhuzamosan összekapcsolva . Yang et al. alkalmazott SFC két pár 7-epimer spiro-oxindol alkaloid (137-140) preparatív elválasztására az Uncaria macrophylla (a TCM Uncariae Ramulus Cum Uncis növényi forrása) horgokkal ellátott szárakból egy Viridis Prep Silica 2-EP OBD oszlopon, 0,2% dea módosított S-CO2-t tartalmazó acetonitrillel. Az SFC-ben alkalmazott nem vizes mobil fázis megakadályozta az elválasztott spiro-oxindol alkaloidok tautomerizációját ., Az SFC-t a természetes enantiomerek elválasztására is alkalmazzák. (R,S)-a goitrin (141-142) a TCM Izatidis Radix hatóanyaga. Az (R) és (S) goitrinek királis elválasztását sikeresen sikerült elérni prep-SFC-vel egy Chiralpak IC oszlopon, acetonitrillel, mint szerves módosítóval .
Struktúrák vegyületek 131-142
Molekuláris színű, technológia
Molekuláris színű, technológia már egy vonzó szeparációs módszer az elmúlt évtizedben köszönhetően egyedi jellemzői, amelyek magukban foglalják a nagy szelektivitás, alacsony költségű, könnyen készítmény. A sablonmolekulák méretének, alakjának és funkcionális csoportjainak memóriájával sok egymást kiegészítő üreg keletkezik, amikor a sablonmolekulákat eltávolítják a molekuláris nyomott polimerből (MIP)., Így a sablonmolekula és annak analógjai a MIP specifikus felismerésével és szelektív adszorpciójával rendelkeznek. MIPs már széles körben használják a szétválasztása természetes termékek vagy szilárdfázisú extrakciós szorbensek minta előállítására növényi anyagok gazdagítják a kisebb vegyületek.
Ji et al. többsablon molekulárisan nyomott polimereket fejlesztett ki DL-tirozin és fenilpiruvinsav felhasználásával mint a dencichin elválasztására szolgáló sablonmolekulák (143.ábra). 19) a Panax notoginseng vízkivonatából., Mind a dencicin, mind a DL-tirozin (144) sablonmolekula tartalmaz egy amino (NH2) csoportot és egy karbonsav (COOH) csoportot, a másik sablon molekula, a fenilpiruvinsav (145) α-keto-sav (COCOOOH) csoporttal rendelkezik, amely szintén megtalálható a dencicin szerkezetében . Ma et al. preparatív elválasztási módszert fejlesztett ki a szolanezol (146) elkülönítésére a dohánylevelektől a MIP alapú vakukromatográfiával., A MIP-t metil-metakriláttal monomerként, szolanezol mint sablonmolekula és etilénglikol-dimetakrilát mint térhálósító szuszpenzió polimerizációs módszerrel állítottuk elő. Összesen 370,8 mg 98,4% – os tisztaságú szolanezolt választottunk el a dohánylevél kivonatától, amelynek hozama a dohánylevél száraz tömegének 2,5% – a volt . Te és al. a thermo-érzékeny mágneses MIP-t használta a három fő kurkuminoid, a kurkumin (147), A demetoxycurcumin (148) és a bisdemethoxycurcumin (149) elválasztására a TCM Curcumae Longae Rhizoma-ból (a Curcuma longa rizóma)., A tervezett termo-érzékeny mágneses MIP mutatott jó imprinting tényező kurkuminoidok közötti tartományban 2.4 és 3.1, termo-érzékenységet és gyors mágneses elválasztás (5 s) .
143-149
szimulált mozgó ágy kromatográfia
szimulált mozgó ágy (SMB) a kromatográfia több oszlopot használ álló fázisokkal (ágy)., A countercurrent mozgása az ágy szimulált keresztül rotary szelepek, amelyek rendszeresen kapcsoló a bemeneti (takarmány, felhasználás), valamint outlet (kivonat raffinátum). Az SMB folyamat egy folyamatos elválasztási módszer, amely hatékony eszköz a természetes termékek nagyszabású elválasztásához, azzal az előnnyel, hogy rövidebb idő alatt alacsonyabb az oldószerfogyasztás.
két ciklopeptid, ciklolinopeptid C és E (150-151, ábra., 20), kapott lenmagolaj segítségével három zóna SMBC nyolc preparatív HPLC normál fázisú gömb alakú szilikagél oszlopok, valamint az abszolút etanol, mint a deszorbens . Kang et al. kifejlesztett egy tandem SMB folyamat, amely két, négy-zóna SMB egység egy sorozat az azonos adszorbens méretű részecskék a Gyűrű, Gyűrű II. külön paclitaxel (taxol, 74) (Fig. 11), 13-dehidroxi-baccatin III (152) és 10-deacetil-paklitaxel (153). A paklitaxelt az első SMB-egységben nyerték vissza, míg a második SMB-egységben a 13-dehidroxibakkatin III és a 10-deacetil-paklitaxel osztódott el ., A Mun ezt az SMB-kromatográfiás módszert különböző részecskeméretű adszorbens alkalmazásával fejlesztette ki az I. és II. gyűrűben . Szuperkritikus folyadékok is lehet használni, mint a deszorbens SMB kromatográfia. Liang et al. sikeresen alkalmazott szuperkritikus szén-dioxid etanollal, mint a deszorbens egy három zónás SMB külön resveratrol (60) (ábra. 9) és emodin (44) (ábra. 4) a TCM Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix nyers kivonatából .
Struktúrák vegyületek 150-153
többdimenziós kromatográfiás elválasztás
a komponensek A kivonat kitéve elkülönítés volt bonyolult, de általában, nem tiszta vegyület lesz külön egy kromatográfiás oszlop. A szilárd fázisú extrakción alapuló többdimenziós elválasztás, valamint a különböző álló fázisú oszlopok összekapcsolása nagyban javítja az elválasztás hatékonyságát., A kereskedelmi többdimenziós szétválasztó berendezések piacra lépésével a természetes termékek szétválasztása egyre gyorsabbá, hatékonyabbá és automatikusabbá válik.
154-167