L’antigene per il test FTA-ABS è batteri interi. I batteri non possono essere coltivati su supporti di laboratorio, quindi gli organismi utilizzati sono una sospensione liofilizzata di T. pallidum estratta dal tessuto testicolare del coniglio. Questo si sviluppa su e fissato a una diapositiva. Il siero del paziente viene miscelato con un assorbente (la parte” ABS ” del test) contenente un estratto di un treponema non patogeno, Treponema phagedenis biotipo Rieter. Lo scopo dell’assorbente è quello di rimuovere gli anticorpi anti-treponemici che non sono specifici per i batteri della sifilide., Il siero del paziente pre-adsorbito viene quindi aggiunto al vetrino; se il paziente è stato infettato dalla sifilide, i loro anticorpi si legheranno ai batteri. L’anticorpo anti-treponeme marcato con FITC (un fluoroforo) e gli anticorpi anti-umani marcati con TRITC (un altro fluoroforo) vengono aggiunti come anticorpi secondari. La posizione della spirocheta viene identificata utilizzando la colorazione FITC e la colorazione TRITC identifica se il paziente ha anticorpi anti-T. pallidum (che si legano alla stessa spirocheta).