Teknikker for utvinning og isolering av naturlige produkter: en omfattende gjennomgang

komponentene i utdrag fra nevnte metodene er kompliserte og inneholder en rekke naturlige produkter som krever ytterligere separasjon og rensing for å få den aktive brøkdel eller rene naturlige produkter. Avstanden avhenger av fysisk eller kjemisk forskjell for den enkelte naturlig produkt., Kromatografi, spesielt kolonne kromatografi, er den viktigste metoden som brukes for å få rene naturlige produkter fra en kompleks blanding.

Separasjon basert på adsorpsjon egenskaper

Adsorpsjon kolonne kromatografi er mye brukt for separasjon av naturlige produkter, særlig i den første separasjon scenen, på grunn av sin enkelhet, høy kapasitet og lave kostnader for adsorbents som silika gel og macroporous harpiks. Avstanden er basert på forskjellene mellom de adsorpsjon slektskap av naturlige produkter for overflaten av adsorbents., Det utvalget av adsorbents (stasjonær fase) så vel som den mobile fasen er avgjørende for å oppnå god separasjon av naturlige produkter, kan du maksimere utvinning av mål forbindelser og unngå irreversible adsorpsjon av mål forbindelser til adsorbents.

Silica gel er den mest brukte adsorbent i phytochemical etterforskning. Det ble anslått at nærmere 90% av phytochemical separasjon (preparative skala) var basert på silica gel. Silica gel er en polar absorberende med silanol grupper. Molekyler som er bevart av silica gel gjennom hydrogen obligasjoner og dipol–dipol interaksjon., Dermed, polar naturlige produkter er beholdt lenger i silica gel kolonner enn de upolare. Noen ganger, bestemte polar naturlige produkter kan gjennomgå irreversible chemisorption. Deaktivering av silica gel ved å legge vann før bruk eller ved hjelp av en vann-inneholder mobile fasen vil svekke adsorpsjon. Alvorlig tailing kan oppstå når som skiller alkaloider på silica gel, og i tillegg en liten mengde ammoniakk eller organiske aminer som triethylamine kan redusere tailing., Tolv alkaloider som tilhører methyl chanofruticosinate gruppe med seks nye alkaloider, prunifolines A–F (68-73, Fig. 11), ble innhentet fra blad av Kopsia arborea ved første silika gel kolonne kromatografi bruk av gradient MeOH–CHCl3 som den mobile fase etterfulgt av sentrifugal TLC ved hjelp av ammoniakk mettet Et2O–hexane eller EtOAc/hexane systemer som eluent .

Alumina (aluminium oksid) er en sterk polar adsorbent brukt i separasjon av naturlige produkter spesielt i separasjon av alkaloider. Den sterke positive feltet av Al3+ og grunnleggende områder i alumina som påvirker lett polarisert forbindelser føre til adsorpsjon på alumina som er forskjellig fra den på silica gel., Anvendelsen av alumina i separasjon av naturlige produkter har blitt betraktelig redusert i de siste årene fordi det kan katalysere dehydrering, nedbrytning eller isomerization under separasjon. Zhang og Su rapportert en kromatografiske protokollen ved hjelp av grunnleggende alumina å skille taxol (74, Fig. 11) fra ekstrakt av Taxus cuspidate callus kulturer og funnet utvinning av taxol var mer enn 160%. De fant at økningen av taxol kom fra isomerization of 7-epi-taxol (75) catalyzed av alumina., Det ble også funnet at en liten mengde taxol kan deles opp for å baccatin III (76) og 10-deacetylbaccatin III (77) i alumina-kolonne . Videre undersøkelser av separasjon av taxol på sur, nøytral og basisk alumina indikerte at Lewis souci og grunnleggende aktivitet kjerner på overflaten av alumina indusert den isomerization of 7-epi-taxol å taxol .

strukturer polyamides brukt i kromatografi inneholde både acryl og amide grupper., Hydrofobe og/eller hydrogen bond samhandling vil skje i polyamid kolonne kromatografi avhengig av sammensetningen av den mobile fasen. Når polare løsemidler, som for eksempel vandig løsemidler brukes som den mobile fasen, polyamides fungere som non-polar stasjonær fase og kromatografi atferd er lik snudd-fase kromatografi. I kontrast, den polyamides fungere som polar stasjonær fase og kromatografi atferd er lik normal fase kromatografi., Polyamid kolonne kromatografi er en vanlig verktøy for separasjon av naturlige polyfenoler inkludert anthraquinones, fenoliske syrer og flavonoider, som mekanismer som er tilskrevet hydrogen bond dannelse mellom polyamid absorbenter, mobil fase og mål forbindelser. Gao et al. studerte kromatografi oppførsel av polyfenoler som er inkludert fenoliske syrer i kroppen på polyamid-kolonnen. Det ble funnet at polyamid fungert som en hydrogen bond-akseptor, og tallene av fenoliske hydroxyls og deres posisjoner i molekylet påvirket styrken av adsorpsjon ., I tillegg til polyfenoler, separasjon av andre typer av naturlige produkter av polyamid kolonne kromatografi ble også rapportert. Den totale saponiner av Kuqingcha kan bli beriket av polyamid kolonne kromatografi, som i betydelig grad redusert systolisk trykk av SHR rotte . Ved hjelp av en blanding av dichloromethane og metanol i en gradient som eluent, de syv store isoquinoline alkaloider i Coptidis Rhizoma inkludert berberine (39), coptisine (40), palmatine (41), jatrorrhizine (42), columbamine (78), groenlandicine (79) (Fig. 4), og magnoflorine (80, Fig., 11) ble separert i ett-trinn polyamid kolonne kromatografi .

Adsorptive macroporous harpikser er polymer adsorbents med macroporous strukturer, men uten ion exchange grupper som kan selektivt adsorbere nesten alle typer naturlige produkter. De har vært mye brukt enten som et frittstående system, eller som en del av en forbehandling prosessen for å fjerne urenheter eller berikende mål forbindelser på grunn av sine fordeler, som inkluderer høy adsorptive kapasitet, relativt lav kostnad, enkelt regenerering og lett skalere opp., Den adsorptive mekanismer for adsorptive macroporous harpiks inkluderer elektrostatiske krefter, hydrogenbinding, komplekse dannelse og størrelse-sikting handlinger mellom harpiks og naturlige produkter i løsningen. Areal, pore diameter og polaritet er de viktigste faktorene som påvirker kapasiteten av harpiks . 20(S)-protopanaxatriol saponiner (PTS) (81) og 20(S)-protopanaxadiol saponiner (PDS) (82, Fig. 11) er kjent som to store bioaktive komponenter i roten av Panax notoginseng., PTS og PDS ble vellykket adskilt med 30 og 80% (v/v) vandig etanol løsninger fra D101 macroporous harpiks kolonnen, henholdsvis. Den kromatografi atferd i PDS-og PTS var nær snudd-fase kromatografi når man sammenligner de kromatografiske profiler av macroporous harpiks kolonne kromatografi til HPLC chromatogram på en Zorbax SB-C18 kolonne . Nylig, Meng et al. fikk totalt saponiner av Panacis Japonici Rhizoma (PJRS) ved hjelp av D101 macroporous harpiks., Innholdet av de fire store saponiner, chikusetsusaponins V (55), IV (56) og IVa (57), og pseudoginsenoside RT1 (58) (Fig. 8), i innhentet PJRS var mer enn 73%. Den PJRS fungerte som standard referanse for kvalitetskontroll av Panacis Japonici Rhizoma . Noen forskere antar at den viktigste adsorptive mekanisme mellom macroporous harpiks og polyfenoler som var forbundet med hydrogenbinding dannelse mellom oksygen atom av ether bond av resin og hydrogen atom av fenoliske hydroksyl gruppe av fenol., Hydrogen binding samhandling force ble betydelig påvirket av pH-verdien i løsningen .

Silver nitrat er en annen nyttig en solid støtte i separasjon av naturlige produkter. De naturlige produkter som inneholder π elektroner reversibly samhandle med sølvioner for å danne polar komplekser. Jo større antall dobbeltbindinger eller aromaticity av naturlig produkt, jo sterkere complexation former. Silver nitrat er vanligvis impregnert på silica gel (SNIS) eller alumina for separasjon. Flere forskningsgrupper rapportert separasjon av fettsyrer på SNIS . Wang et al., rapportert isolasjon av zingiberene fra ingefær oleoresin av SNIS kolonne kromatografi . Et par av isomerene, brasiliensic syre (83, Fig. 11) og isobrasiliensic syre (84), ble skilt fra Calophyllum brasiliense av Lemos et al. på en SNIS kolonne . Noen forskningsgrupper også brukt silver nitrat i de to-fase system i høy hastighet mot gjeldende kromatografi (HSCCC) for å bedre separasjon. Xanthochymol (85) og guttiferone E (86) er et par av π bond benzophenone isomerene fra Garcinia xanthochymus av AgNO3-HSCCC., Den elution bestilling av π bond-isomerene i denne AgNO3-HSCCC separasjon er interne π bond (tidligere) < terminal, som er identisk med den som er observert fra SNIS kolonne kromatografi .

Separasjon basert på fordelingskoeffisient

Partisjon kromatografi (PC) følger væske–væske ekstraksjon prinsippet basert på den relative løselighet i to forskjellige immiscible væsker. I tidlig stadium, en flytende fase ble belagt til en solid matrix (silica gel, karbon -, cellulose, etc.) som den stasjonære fasen og annen flytende fase ble ansatt som den mobile fasen., Ulempen med en lett fjernes stasjonær fase og gjentatt resultater har ført til denne typen PC-en blir sjelden brukt i dag. Den bundne-fase, der væske i stasjonære fasen er kjemisk bundet til inert støtte, som brukes som stasjonær fase overvinner de ulemper. Kommersielt tilgjengelig alkyl som C8 og C18, aryl, cyano og amino erstattet silanes er ofte brukt som limt faser, som er mye brukt for å skille et utvalg av naturlige produkter, spesielt i de siste rensing trinn.

Tre PTS (notoginsenoside R1 (87) (Fig., 11), ginsenosides Rg1 (55) (Fig. 8) og Re (88) (Fig. 11)) og to PDS (Fig. 3) var godt atskilt i en C18 kolonne med EtOH–H2O system som den mobile fasen . En roman polyakrylamid-basert silica stasjonære fasen ble syntetisert av Cai et al. og var med hell brukes i separasjon av galactooligosaccharides og saponiner av Paris polyphylla med EtOH–H2O som den mobile fasen .

Counter-current kromatografi (CCC) er en slags PC som inneholder væske i stasjonære fasen av tyngdekraften eller sentrifugal kraft., CCC har sjelden blitt brukt i tidlige stadier på grunn av sin dårlige stasjonær oppbevaring, lang separasjon tid-og arbeidskrevende prosess. CCC ble betydelig forbedret i 1980-årene, imidlertid, når moderne, CCC, inkludert HSCCC og sentrifugal-partisjon kromatografi (CPC), ble utviklet. Den hydrodynamiske CCC systemer som HSCCC har en planetens rotasjon bevegelse rundt to rotere aksene med ingen roterende tetninger, som tilbyr et lavt trykkfall prosessen. Hydrostatisk CCC, f.eks.,, sentrifugal-partisjon kromatografi, bruker bare en roterende akse og har en serie av sammenhengende kamre for å felle den stasjonære fasen, som tilbyr en høyere oppbevaring av stasjonær fase og en høyere arbeidstrykk enn HSCCC. Det høye trykket i systemet CPC hindrer forbedring av oppløsningen ved å øke lengden på søylen. Høy ytelse CCC (HPCCC) representerer en ny generasjon av hydrodynamiske CCC og fungerer på samme måte som HSCCC, men med en mye høyere g-nivå., Den HPCCC instrumenter generere mer enn 240 g, mens tidlig HSCCC utstyr ga g-nivåer på mindre enn 80 g. HPCCC forkorter avstanden tid til mindre enn en time i forhold til flere timer i forrige HSCCC og kan oppnå minst ti ganger gjennomstrømning av en HSCCC instrument ., I forhold til den konvensjonelle kolonne, separasjon metode ved hjelp av en solid stasjonær fase, både hydrostatisk og hydrodynamiske CCC-systemer tilbyr noen fordeler, inkludert eliminering av irreversible adsorpsjon og topp tailing, høy lastekapasitet, høy eksempel recovery, minimal risiko for eksempel denaturering og lave solvent forbruk. Begrensning av CCC er at det bare skiller forbindelser i en relativt smal polaritet vinduet. I løpet av de siste 20 årene, HSCCC, HPCCC og CPC vakte stor oppmerksomhet i separation science og har vært mye brukt i separasjon av naturlige produkter., Tang et al. utviklet en HSCCC metode som bruker en to-fase solvent-system som består av etylacetat–n-butanol–etanol–vann (4:2:1.5:8.5, v/v/v/v) til å skille seks flavone C-glykosider (89-94, Fig. 12), inkludert to romanen forbindelser fra Lophatherum gracile . HSCCC, HPCCC og CPC har også blitt brukt i separasjon av flyktig olje, som er vanskelig å skille via konvensjonelle kolonne kromatografi., Seks flyktige forbindelser (curdione (95), curcumol (96), germacrone (97), curzerene (98), 1,8-cineole (99) og β-elemene (100)) ble isolert av CPC fra den essensielle olje av Curcuma wenyujin ved hjelp av en nonaqueous to-fase solvent system bestående av petroleum eter–acetonitrile–aceton (4:3:1 v/v/v) ., Fire store sesquiterpenoids (ar-turmerone (101), α-turmerone (102), β-turmerone (103), og E-atlantone (104)) med lignende strukturer ble separert fra den essensielle olje av Curcuma longa i en enkelt HSCCC kjøre ved hjelp av en to-fase solvent system bestående av n-heptan–ethyl acetate–acetonitrile–vann (9.5/0.5/9/1, v/v) og hver sammensatte oppnådd over 98% renhet . Linalool (105), terpinen-4-ol (106), α-terpineol (107), s-anisaldehyde (108), anethole (109) og foeniculin (110) ble vellykket isolert fra den essensielle olje av Pimpinella anisum av HPCCC ved hjelp av en trinnvis gradient elution ., Li et al. utviklet et CPC-metode for separasjon av patchouli alkohol (111) med en nonaqueous eter–acetonitrile (1:1 v/v) solvent-systemet. Mer enn 2 g av patchouli alkohol med over 98% renhet isolert fra 12.5 g av essensielle oljen over en 240 ml-kolonnen . Det store volumet (flere liter) kolonne har blitt tatt i bruk i kommersielle hydrostatisk CCC og hydrodynamiske CCC utstyr for pilot/industriell skala separasjon. Noen rapporter kan fås på grunn av kommersiell konfidensialitet. Det er vanskelig å bedømme om hydrostatisk eller hydrodynamiske CCC er bedre for industrielle applikasjoner., Brukere kan velge forskjellige typer av CCC-instrumentet for ulike formål. Når den stasjonære fasen er dårlig bevart i hydrodynamiske CCC på grunn av høy viskositet og små tetthet forskjeller mellom mobile og stasjonære faser, hydrostatisk CCC er mer praktisk enn hydrodynamiske CCC fordi bevaring av den stasjonære fasen av hydrostatisk CCC er mindre følsomme for de fysiske egenskapene til flytende systemer og vil ha en høyere bevaring av den stasjonære fasen., Når den stasjonære fasen er godt bevart i hydrodynamiske CCC, høyere separasjon effektivitet vil bli innhentet fra hydrodynamiske CCC enn fra hydrostatisk CCC med samme væske-systemet og lignende kolonne volumer på grunn hydrostatisk CCC har relativt lav partisjon effektivitet på grunn av en begrenset grad av blanding, og den hydrodynamiske systemet gir effektiv blanding å gi en høy partisjon effektivitet.

Separasjon basert på den molekylære størrelsen

separasjon av naturlige produkter av membran filtrering (MF) eller gel filtrering kromatografi (GFC) er basert på deres molekylære størrelser.

Membran filtrering (MF)

I MF, den semipermeable membranen tillater mindre molekyler til å passere gjennom, og beholder større molekyler., MF av naturlige produkter kan karakteriseres som microfiltration, ultrafiltration, og nanofiltration basert på porestørrelse av membranen påføres.

Membran filtrering har blitt et kraftig verktøy for konsentrasjon, avklaring og fjerning av urenheter i laboratoriet, samt i mat og farmasøytisk industri. Innholdet av sum fenoler (338%), klorogensyre (66) (Fig. 10) (483%), teobromin (112, Fig., 13) (323%), koffein (113) (251%), kondenserte tanniner (278%) og saponiner (211%) i vandig ekstrakt av Ilex paraguariensis var betydelig økte med nanofiltration . Kopling membran filtrering brukes når en enkelt membran filtrering trinn er ikke tilfredsstillende. En sekvens av microfiltration, ultrafiltration og nanofiltration ble brukt i isolasjon av bioaktive komponenter fra oliven blad ekstrakt. Microfiltration etterfulgt av ultrafiltration fjernet urenheter større enn 5 kDa., Nanofiltration ble gjenopprettet antioxidative og antibakteriell polyfenoler og flavonoider, og innholdet av de viktigste komponenten, oleuropein (114), i nanofiltration retentate var konsentrert om lag ti ganger .

Gel filtrering kromatografi (GFC)

Gel filtrering kromatografi er også kjent som gel gjennomtrengning kromatografi eller størrelse utelukkelse kromatografi., De små molekylene har en lengre oppholdstid i GFC enn store molekyler.

Sephadex er dannet av cross-linking dextran, og G-typer av Sephadex ble brukt for separasjon av hydrofile forbindelser som peptider , oligosakkarider og polysakkarider .

Sephadex LH20, en hydroxypropylated derivat av Sephadex G25, har både hydrofobe og hydrofile natur. En adsorpsjon mekanismen var også involvert i separasjon bruk av Sephadex LH-20. Sephadex LH-20 kan brukes til separasjon av et bredt utvalg av naturlige produkter i enten en vandig eller ikke-vandig solvent-systemet., Den feruloylated arabinoxylan oligosakkarider av flerårige korn korn middels hvete var godt adskilt med Sephadex LH-20 bruke 100% vann, som den mobile fasen . Tre nye pyrimidin diterpenes, axistatins 1-3 (115-117, Fig. 14) sammen med tre kjente formamides (118-120) ble isolert fra anti-kreft aktiv CH2Cl2 brøkdel av Agelas axifera over Sephadex LH-20 kolonner med en serie av løsemiddel systemer , etterfulgt av rensing ved hjelp av Prep-HPLC .

Polyakrylamid (bio gel P) og cross-linked agarose ble også brukt i separasjon av naturlige produkter.

Separasjon basert på ioniske styrke

Ion-exchange-kromatografi (IEC) skiller molekyler basert på forskjeller i netto overflaten kostnad. Noen naturlige produkter, slik som alkaloider og organiske syrer har en funksjonell gruppe er i stand til ionisering, kan være atskilt med IEC., De ladete molekyler kunne bli fanget og sluppet av ion-exchange harpiks ved å endre den ioniske styrke mobil fase (f.eks., endre pH eller salt konsentrasjon). Cation ion-exchange-harpikser ble brukt for separasjon av alkaloider, mens anion ion-exchange-harpikser ble brukt for separasjon av naturlige, organiske syrer og fenoler.

Den positivt ladede anthocyanins var atskilt fra den nøytrale polyphenolic forbindelser i XAD-7 behandlet Actinidia melanandra frukt (kiwifruit) trekke ut ved hjelp av Dowex 50WX8 cation ion-exchange-resin ., Feng og Zhao brukt semi-preparative kromatografi å skille (−)epigallocatechin-gallate og (−)epicatechin-gallate (122) i te råolje ekstrakt med polysakkarid-basert svakt sure gel CM-Sephadex C-25 . En ny alkaloid, fumonisin B6 (123), sammen med en kjent alkaloid, fumonisin B2 (124), ble isolert av IEC over Strata X-C blandet-modus RP-cation exchange harpiks etterfulgt av omvendt fase kromatografi fra soppen Aspergillus niger NRRL 326 kulturer ekstrakt .

Andre moderne separasjon teknikker

Molekylær destillasjon (MD)

Molekylær destillasjon skiller den molekylære ved destillasjon under vakuum ved en temperatur langt under sitt kokepunkt. Det er en egnet destillasjon metode for å skille thermosensitive og høy-molekylær-vekt forbindelser. Borgarello et al. fikk en thymol (125, Fig., 16) berikelse brøkdel fra oregano eterisk olje av molekylær destillasjon modellert av kunstige nevrale nettverk. De fikk del hadde antioksidant egenskaper og kunne stabilisere solsikkeolje . Tre typer ftalater ble effektivt fjernet fra søt appelsin olje av molekylær destillasjon under optimale forhold (fordampning temperatur på 50 °C, fordamper trykk på 5 kPa og en mate vannføring på 0,75 ml/min) .

Preparative gass kromatografi (Prep-GC)

Gass kromatografi (GC) med høy separasjon effektivitet og rask separasjon og analyse gjør at det kan være den ideelle preparative metode for separasjon av flyktige forbindelser. Injeksjon port, kolonne, delt enheten og felle enheten av GC-utstyr må endres for preparative separasjon på grunn av mangel på kommersielle Prep-GC .

Fem flyktige forbindelser, nemlig curzerene (98) (6.,6 mg), β-elemene (100, Fig. 12) (5.1 mg), curzerenone (126) (41.6 mg), curcumenol (127) (46.2 mg), og curcumenone (128) (21.2 mg) (Fig. 17), ble separert fra metanol ekstrakt av Curcuma Rhizome av Prep-GC over en rustfritt stål kolonne pakket med 10% OV-101 (3 m × 6 mm, jeg.d.) etter 83 enkelt injeksjoner (20 µl) . Prep-GC ble også søkt om separasjon av naturlige isomerene. Av en total av 178 mg av cis-asarone (129) og 82 mg av trans-asarone (130) ble innhentet fra den essensielle olje av Acorus tatarinowii etter 90 enkelt injeksjoner (5 µl) på den samme kolonnen som ovenfor ., Prep-GC har blitt et viktig skille metode for naturlig flyktige forbindelser; imidlertid, en tyngre eksempel belastning og stor diameter preparative kolonne ansatt redusert effektivitet . I mellomtiden, de ulemper Prep-GC, inkludert mangel på kommersielle Prep-GC-utstyr, forbruk av et stort volum av transportør gass, dekomponering av thermolabile forbindelser under høyt drift temperatur, vanskeligheter brøkdel av samlingen, og lav produksjon, fortsatt begrense bruken av Prep-GC.

Superkritisk fluid kromatografi (SFC)

SFC bruker superkritisk væske som den mobile fasen. SFC integrerer fordelene av både GC og væske-kromatografi (LC) som superkritisk væske innehar egenskaper av høy oppløsning kapasitet, høy diffusivity og lav viskositet, som tillater rask og effektiv separasjon., Dermed, SFC kan bruke en lengre kolonne og mindre partikler av den stasjonære fasen enn HPLC, som gir et større antall teoretiske plater og bedre separasjon. SFC kan brukes til separasjon av ikke-flyktige eller termisk labilt forbindelser som GC er ikke aktuelt. SFC-systemer er kompatibel med et bredt spekter av ulike detektorer, inkludert de som brukes i LC og GC-systemer., Polaritet av brukte mobile fasen, S-CO2, i SFC er nær polaritet av hexane, med det resultat at SFC ble brukt for separasjon av non-polar naturlige produkter, som for eksempel fettsyrer, terpenes og essensielle oljer for mange år. Eluent modifikatorer slik metanol og acetonitrile forbedre elution styrke, som er økende interesse i å skille polar naturlige produkter av SFC .

Zhao et al. hell atskilt tre par av 25 R/S diastereomeric spirostanol saponiner (131-136, Fig., 18) fra TCM Trigonellae Sæd (frø av Trigonella foenum-graecum) på to CHIRALPAK IC kolonner kombinert i tandem . Yang et al. anvendt SFC for preparative separasjon av to par 7-epimeric spiro oxindole alkaloider (137-140) fra stammer med kroker av Uncaria macrophylla (en urte kilde for TCM Uncariae Ramulus Cum Uncis) på en Viridis Prep Silica 2-EP OBD-kolonnen ved hjelp av acetonitrile inneholder 0.2% DEA endret S-CO2. Den ikke-vandig mobile fasen brukes i SFC forhindret tautomerization av separert spiro oxindole alkaloider ., SFC er også brukt i separasjon av naturlige enantiomers. (R,S)-goitrin (141-142) er den aktive ingrediensen av TCM Isatidis Radix. Den chiral separasjon av (R) og (S) goitrins ble vellykket oppnås ved prep-SFC på en Chiralpak IC-kolonnen ved hjelp av acetonitrile som organisk modifier .

Molekylær trykt teknologi

Molekylær trykt teknologi har blitt en attraktiv separasjon metode i det siste tiåret, på grunn av sine unike egenskaper, som inkluderer høy selektivitet, lave kostnader og enkel tilberedning. Mange komplementære hulrom med minnet av størrelse, form og funksjonelle grupper av malen molekyler som genereres når malen molekyler er fjernet fra den molekylære trykt polymer (MIP)., Dermed mal molekylet og dets analoger vil ha spesifikke anerkjennelse og selektiv adsorpsjon for MIP. MIPs, har vært mye brukt i separasjon av naturlige produkter eller som fast-fase ekstraksjon sorbents for eksempel utarbeidelse av urte materialer for å berike mindre forbindelser.

Ji et al. utviklet multi-mal molekylært trykt polymerer ved hjelp av DL-tyrosin og phenylpyruvic syre som mal molekyler for å skille dencichine (143, Fig. 19) fra vann ekstrakt av Panax notoginseng., Både dencichine og mal molekyl av DL-tyrosin (144) inneholder en aminosyre (NH2) – gruppe og en karboksylsyre (COOH) gruppe, og den annen mal molekyl, phenylpyruvic syre (145), har en α-keto-syre (COCOOH) gruppe som kan også bli funnet i strukturen av dencichine . Ma et al. utviklet en preparative separasjon metode for å skille solanesol (146) fra tobakk blader av flash kromatografi basert på MIP., MIP var forberedt med metylmetakrylat som monomer, solanesol som mal molekyl og etylenglykol dimethacrylate som crosslinker av en suspensjon polymerisering metode. Totalt 370.8 mg solanesol med 98.4% renhet var separert fra ekstrakt av tobakk forlater med et utbytte på 2,5% av tørrvekt av tobakk blader . Du et al. brukte thermo-responsive magnetiske MIP å skille de tre store curcuminoids, curcumin (147), demethoxycurcumin (148), og bisdemethoxycurcumin (149), fra TCM Curcumae Longae Rhizoma (den rhizome av Curcuma longa)., Den er designet thermo-responsive magnetiske MIP viste god preging faktor for curcuminoids i et område mellom 2,4 og 3.1, termo-respons og rask magnetisk separasjon (5 s) .

Simulert moving bed kromatografi

Simulert flytte seng (SMB) kromatografi bruker flere kolonner med stasjonære faser (bed)., Den countercurrent bevegelse av sengen er simulert gjennom roterende ventiler, som med jevne mellomrom slår innløp (fôr og eluent) og utløp (utdrag og raffinate). SMB-prosessen er en kontinuerlig separasjon metode og et kraftig verktøy for stor-skala separasjon av naturlige produkter med fordelen av lavere solvent forbruk over en kortere periode.

To cyclopeptides, cyclolinopeptides C og E (150-151, Fig., 20), ble innhentet fra linfrø olje ved hjelp av en tre-sone SMBC med åtte preparative HPLC normal fase sfærisk silica gel kolonner og bruker absolutt etanol som desorbent . Kang et al. utviklet en tandem SMB prosess som består av to fire-sone SMB-enheter i en serie med samme adsorbent partikkelstørrelser i Ringen jeg og Ring II for å skille paclitaxel (taxol, 74) (Fig. 11), 13-dehydroxybaccatin III (152), og en 10-deacetylpaclitaxel (153). Paclitaxel ble gjenopprettet i den første SMB-enheten mens 13-dehydroxybaccatin III og 10-deacetylpaclitaxel ble separert i andre SMB-enhet ., Mun forbedret dette SMB-kromatografi-metoden ved å bruke forskjellige partikkelstørrelser adsorbent i Ringen jeg og Ring II . Superkritisk væske kan også brukes som desorbent i SMB-kromatografi. Liang et al. hell brukes superkritisk karbondioksid med etanol som desorbent for en tre-sone SMB for å skille reservatrol (60) (Fig. 9) og emodin (44) (Fig. 4) fra en primitiv utdrag av TCM Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix .

Multi-dimensjonale kromatografiske separasjon

komponentene i utdrag utsatt for atskillelse var komplekse, og generelt, ingen ren sammensatte vil bli delt opp i en kolonne kromatografi. Multi-dimensjonale separasjon basert på fast fase ekstraksjon og kopling av flere kolonner med forskjellige stasjonære faser i stor grad forbedrer separasjon effektivitet., Med mer kommersielle flere dimensjonale separasjon utstyr som kommer inn i markedet, separasjon av naturlige produkter er blitt mer rask, effektiv og automatisert.