Técnicas para a extração e isolamento de produtos naturais: uma revisão abrangente

Os componentes a extrair a partir de métodos acima são complexas e contêm uma variedade de produtos naturais, que exigem uma maior separação e purificação para obter o active fração puro ou produtos naturais. A separação depende da diferença física ou química do produto natural individual., A cromatografia, especialmente a cromatografia em coluna, é o principal método utilizado para obter produtos naturais puros de uma mistura complexa.a cromatografia em coluna de adsorção é amplamente utilizada para a separação de produtos naturais, especialmente na fase de separação inicial, devido à sua simplicidade, elevada capacidade e baixo custo de adsorventes, tais como sílica-gel e resinas macroporosas. A separação baseia-se nas diferenças entre as afinidades de adsorção dos produtos naturais para a superfície dos adsorventes., A seleção de adsorventes (fase estacionária), bem como a fase móvel, é crucial para alcançar uma boa separação dos produtos naturais, maximizar a recuperação dos compostos-alvo e evitar a adsorção irreversível dos compostos-alvo nos adsorventes.o sílica-gel é o adsorvente mais utilizado na investigação fitoquímica. Estima-se que cerca de 90% da separação fitoquímica (escala de preparação) foi baseada em sílica-gel. Sílica-gel é um absorvente polar com grupos de silanol. Moléculas são retidas pelo sílica–gel através de ligações de hidrogênio e interações dipolo-dipolo., Assim, os produtos naturais polares são retidos mais tempo em colunas de sílica-gel do que as não-polares. Por vezes, certos produtos naturais polares podem sofrer uma quimiorção irreversível. A desactivação do sílica-gel adicionando água antes da utilização ou utilizando uma fase móvel contendo água enfraquecerá a adsorção. Pode ocorrer uma deterioração grave quando se separam alcalóides em sílica-gel, e a adição de uma pequena quantidade de amoníaco ou aminas orgânicas, como a trietilamina, pode reduzir o revestimento., Doze alcalóides pertencentes ao grupo da chanofruticosinato de metilo, incluindo seis novos alcalóides, prunifolinas A-F (68-73, Fig. 11), foram obtidos a partir da folha de Kopsia arborea por cromatografia inicial em coluna de sílica–gel utilizando gradiente MeOH–CHCl3 como fase móvel seguida de TLC centrífuga utilizando sistemas saturados de Et2O-hexano ou EtOAc/hexano como eluente .

de Alumina (óxido de alumínio) é um forte polar adsorvente utilizado na separação de produtos naturais, especialmente na separação de alcalóides. O forte campo positivo de Al3+ e os locais básicos de alumina que afetam compostos facilmente polarizados levam à adsorção de alumina que é diferente da do sílica-gel., A aplicação de alumina na separação de produtos naturais diminuiu significativamente nos últimos anos porque pode catalisar desidratação, decomposição ou isomerização durante a separação. Zhang and Su reported a chromatographic protocol using basic alumina to separate taxol (74, Fig. 11) a partir do extrato de Taxus cuspidate callus culturas e descobriu a recuperação de taxol foi mais de 160%. Eles descobriram que o aumento do taxol veio da isomerização do 7-epi-taxol (75) catalisado pela alumina., Verificou-se também que uma pequena quantidade de taxol poderia ser decomposta em baccatina III (76) e 10-deacetilbaccatina III (77) na coluna alumina . Uma investigação mais aprofundada sobre a separação do taxol em alumina ácida, neutra e de base indicou que os núcleos de Lewis souci e as actividades de base à superfície de alumina induziram a isomerização de 7-epi-taxol a taxol .as estruturas de poliamidas utilizadas na cromatografia contêm grupos Acril e amida., A interacção hidrofóbica e / ou da ligação ao hidrogénio ocorrerá na cromatografia em coluna de poliamida, dependendo da composição da fase móvel. Quando solventes polares, como solventes aquosos, são usados como fase móvel, os poliamidas atuam como a fase estacionária não polar e o comportamento cromatográfico é semelhante à cromatografia de fase reversa. Em contraste, as poliamidas atuam como a fase estacionária polar e o comportamento cromatográfico é semelhante à cromatografia de fase normal., A cromatografia em coluna de poliamida é uma ferramenta convencional para a separação de polifenóis naturais, incluindo antraquinonas, ácidos fenólicos e flavonóides, cujos mecanismos são atribuídos à formação de ligação de hidrogénio entre absorventes de poliamida, fase móvel e compostos-alvo. Gao et al. estudou o comportamento cromatográfico dos polifenóis, incluindo ácidos fenólicos e flavonóides na coluna de poliamida. Verificou-se que a poliamida funcionava como um aceitador de ligação de hidrogénio, e o número de hidroxilos fenólicos e as suas posições na molécula afectavam a força de adsorção ., Além dos polifenóis, foi também referida a separação de outros tipos de produtos naturais por cromatografia em coluna de poliamida. As saponinas totais de Kuqingcha podem ser enriquecidas por cromatografia em coluna de poliamida, o que reduziu significativamente a pressão sistólica do rato SHR . Usando uma mistura de diclorometano e metanol em gradiente eluent, os sete principais isoquinolina alcalóides em Coptidis Rizoma incluindo berberine (39), coptisine (40), palmatine (41), jatrorrhizine (42), columbamine (78), groenlandicine (79) (Fig. 4), e magnoflorina (80, Fig., 11) foram separadas por cromatografia em coluna de poliamida de uma fase.as resinas Macropóricas Adsorptivas são adsorventes de polímeros com estruturas macropóricas, mas sem grupos de permuta iónica que podem adsorver selectivamente quase qualquer tipo de produtos naturais. Eles têm sido amplamente utilizados como um sistema autônomo, ou como parte de um processo de pré-tratamento para remover impurezas ou enriquecer compostos alvo devido às suas vantagens, que incluem alta capacidade adsorptiva, custo relativamente baixo, fácil regeneração e fácil aumento de escala., Os mecanismos adsorptivos das resinas macróforas adsorptivas incluem forças electrostáticas, ligação ao hidrogénio, formação complexa e acções de peneiração por tamanho entre as resinas e os produtos naturais em solução. A superfície, O diâmetro dos poros e a polaridade são os principais fatores que afetam a capacidade das resinas . 20 (S)-protopanaxatriol saponins (PTS) (81) e 20 (s)-protopanaxadiol saponins (PDS) (82, Fig. 11) são conhecidos como dois principais componentes bioativos na raiz de Panax notoginseng., PTS e PDS foram separados com sucesso com 30 e 80% (v/v) de soluções aquosas de etanol da coluna de resina macroporosa D101, respectivamente. Os comportamentos cromatográficos de PDS e PTS estiveram próximos da cromatografia de fase reversa ao comparar os perfis cromatográficos de cromatografia em coluna de resina macroporosa com o cromatograma de HPLC numa coluna de Zorbax SB-C18 . Recentemente, Meng et al. obtido o total de saponinas de Panacis Japonici Rhizoma (PJRS) utilizando resina macroporosa D101., O conteúdo das quatro principais saponinas, chikusetsusaponinas V (55), IV (56) e IVa (57), e pseudoginsenoside RT1 (58) (Fig. 8), nas TJCR obtidas foi superior a 73%. O PJRS serviu de referência padrão para o controlo de qualidade do Panacis Japonici Rhizoma . Alguns pesquisadores assumiram que o principal mecanismo adsorptivo entre resinas macroporosas e polifenóis estava associado com a formação de ligação de hidrogênio entre o átomo de oxigênio da ligação de éter da resina e o átomo de hidrogênio do grupo hidroxil fenólico do fenol., A força de interação de ligação de hidrogênio foi significativamente afetada pelo valor de pH da solução .o nitrato de prata é outro suporte sólido útil na separação de produtos naturais. Esses produtos naturais contendo os elétrons π interagem reversivelmente com íons de prata para formar complexos polares. Quanto maior o número de ligações duplas ou aromaticidade do produto natural, mais forte se forma a complexação. O nitrato de prata é tipicamente impregnado em gel de sílica (SNIS) ou alumina para separação. Vários grupos de pesquisa relataram a separação de ácidos graxos em SNIS . Wang et al., reported the isolation of zingiberene from ginger oleorresin by SNIS column chromatography . Um par de isômeros, ácido brasiliênico (83, Fig. 11) e ácido isobrasílico (84), foram separados de Calophyllum brasiliense por Lemos et al. numa coluna do SNIS . Alguns grupos de pesquisa também aplicaram nitrato de prata no sistema de duas fases na cromatografia contra corrente de alta velocidade (HSCCC) para melhorar a separação. Xanthochymol (85) e guttiferona e (86) são um par de isômeros de ligação π benzofenona de Garcinia xanthochymus por AgNO3-HSCCC., A ordem de eluição dos isômeros da ligação π nesta separação AgNO3-HSCCC é interna da ligação π (anterior) < terminal, que é idêntica à observada da cromatografia em coluna de SNIS .

A separação baseada no coeficiente de partição

cromatografia de partição (PC) segue o princípio de extração líquido–líquido baseado na solubilidade relativa em dois líquidos imiscíveis diferentes. No estágio inicial, uma fase líquida foi revestida a uma matriz sólida (sílica-gel, carbono, celulose, etc.) como a fase estacionária e outra fase líquida foi empregada como a fase móvel., A desvantagem de uma fase estacionária facilmente removida e resultados irrepetíveis levou a este tipo de PC ser raramente usado hoje. A fase ligada, na qual a fase estacionária líquida está quimicamente ligada ao suporte inerte, que é usado como a fase estacionária supera essas desvantagens. Alquilo comercialmente disponível, tais como C8 e C18, aril, ciano e aminoácidos substituídos silanos são muitas vezes utilizados como fases ligadas, que são amplamente utilizados para separar uma variedade de produtos naturais, especialmente na fase de purificação final.

três PTS (notoginsenoside R1 (87) (Fig., 11), ginsenosides Rg1 (55) (Fig. 8) e Re (88) (Fig. 11)) e dois PDS (Fig. 3) foram bem separados em uma coluna C18 usando o sistema EtOH–H2O como a fase móvel . Uma nova fase estacionária de poliacrilamida foi sintetizada por Cai et al. e foi aplicada com sucesso na separação dos galactooligosacarídeos e saponinas da Polifila de Paris com EtOH–H2O como a fase móvel .a cromatografia de Contra-Corrente (CCC) é o tipo de PC que mantém a fase estacionária líquida por gravidade ou força centrífuga., O CCC raramente foi usado em estágios iniciais devido à sua fraca retenção estacionária, tempo de separação longo e processo de trabalho intensivo. CCC foi significativamente melhorado na década de 1980, no entanto, quando CCC moderno, incluindo hsccc e cromatografia de partição centrífuga (CPC), foram desenvolvidos. Os sistemas hidrodinâmicos CCC, como o HSCCC, têm um movimento de rotação planetária em torno de dois eixos rotativos sem focas rotativas, o que oferece um processo de queda de baixa pressão. = = Ligações externas = = ,, cromatografia de partição centrífuga, usa apenas um eixo rotativo e tem uma série de câmaras de interligação para prender a fase estacionária que oferece uma maior retenção da fase estacionária e uma maior pressão do sistema do que a do HSCCC. A alta pressão do sistema na CPC impede a melhoria da resolução aumentando o comprimento da coluna. O CCC de alto desempenho (HPCCC) representa uma nova geração de CCC hidrodinâmico e funciona da mesma forma que o HSCCC, mas com um nível de g muito mais elevado., Os instrumentos HPC geram mais de 240 g, enquanto os primeiros equipamentos hsccc deram níveis g de menos de 80 g. HPC encurta o tempo de separação para menos de uma hora em comparação com várias horas em hsccc anterior e pode alcançar pelo menos dez vezes o rendimento de um instrumento HSCCC ., Em comparação com o método convencional de separação de colunas utilizando uma fase estacionária sólida, tanto os sistemas CCC hidrostáticos como hidrodinâmicos oferecem algumas vantagens, incluindo a eliminação de adsorção irreversível e de corrimento de pico, elevada capacidade de carga, elevada recuperação da amostra, risco mínimo de desnaturação da amostra e baixo consumo de solvente. A limitação do CCC é que ele só separa os compostos em uma janela de polaridade relativamente estreita. Nos últimos 20 anos, HSCCC, HPC e CPC atraíram grande atenção na ciência da separação e têm sido amplamente utilizados na separação de produtos naturais., Tang et al. desenvolveu um método HSCCC usando um sistema de solvente de duas fases, incluindo acetato de etilo-n-butanol-etanol-água (4:2:1.5: 8.5, v/v/v / v / v) para separar seis flavonas c-glicosidos (89-94, Fig. 12), incluindo dois compostos novos de Lophatherum gracile . HSCCC, HPC e CPC também foram aplicados com sucesso na separação de óleo volátil, o que é difícil de separar por cromatografia convencional em coluna., Seis compostos voláteis (curdione (95), curcumol (96), germacrone (97), curzerene (98), 1,8-cineole (99) e β-elemene (100) foram isoladas pelo CPC a partir do óleo essencial de Curcuma wenyujin usando um nonaqueous de duas fases sistema de solventes composta de éter de petróleo–acetonitrilo–acetona (4:3:1 v/v/v) ., Quatro grandes sesquiterpenoids (ar-turmerone (101), α-turmerone (102), β-turmerone (103), e endereço de e-atlantone (104)) com estruturas semelhantes foram separados a partir do óleo essencial de Curcuma longa em um único HSCCC executado usando uma de duas fases solvente sistema composto de n-heptano–acetato de etila–acetonitrilo–água (9.5/0.5/9/1, v/v) e cada composto alcançado mais de 98% de pureza . Linalol (105), terpinen-4-ol (106), α-terpineol (107), p-anisaldeído (108), anetol (109) e foeniculina (110) foram isolados com êxito do óleo essencial de Pimpinella anisum pelo HPC utilizando uma eluição gradiente ., Li et al. desenvolveu um método CPC para a separação do álcool patchouli (111) com um sistema de solvente éter–acetonitrilo não aquoso (1:1, v/v). Mais de 2 g de álcool patchouli com mais de 98% de pureza foram isolados de 12,5 g de óleo essencial ao longo de uma coluna de 240 ml . A coluna de grande volume (vários litros) foi adotada no equipamento comercial hidrostático CCC e hidrodinâmico CCC para separação em escala piloto/industrial. Poucos relatórios poderiam ser obtidos devido à confidencialidade comercial. É difícil avaliar se o CCC hidrostático ou hidrodinâmico é melhor para aplicações industriais., Os utilizadores podem seleccionar diferentes tipos de instrumentos CCC para diferentes fins. Quando a fase estacionária é pouco retido na hidrodinâmica do CCC, devido à alta viscosidade e pequenas diferenças de densidade entre o móvel e estacionária fases, a hidrostática, a CCC é mais prático do que hidrodinâmica CCC porque a retenção da fase estacionária de hidrostática CCC é menos sensível às propriedades físicas dos sistemas líquidos e terá uma maior retenção da fase estacionária., Quando a fase estacionária for bem conservada no ccc hidrodinâmico, obter-se-á maior eficiência de separação do CCC hidrodinâmico do que do CCC hidrostático com o mesmo sistema líquido e volumes de coluna semelhantes, uma vez que o CCC hidrostático tem uma eficiência de partição relativamente baixa devido a um grau limitado de mistura, e o sistema hidrodinâmico proporciona uma mistura eficiente para produzir uma elevada eficiência de partição.

a Separação com base no tamanho molecular

A separação de produtos naturais de filtração por membrana (MF) ou de gel filtração de cromatografia (GFC) é com base em seus tamanhos moleculares.filtração por membrana (MF)

em MF, a membrana semipermeável permite a passagem de moléculas menores e retém as moléculas maiores., MF de produtos naturais pode ser caracterizado como microfiltração, ultrafiltração e nanofiltração com base no tamanho DOS poros da membrana aplicada.a filtração por membrana tem sido uma poderosa ferramenta para a concentração, clarificação e remoção de impurezas no laboratório, bem como nas indústrias de alimentos e farmacêuticas. O conteúdo de fenóis totais( 338%), ácido clorogénico (66) (Fig. 10) (483%), teobromina (112, Fig., 13) (323%), cafeína (113) (251%), taninos condensados (278%) e saponinas (211%) do extrato aquoso de Ilex paraguariensis foram significativamente aumentada pelo nano . Aplica-se filtração por membrana de acoplamento quando uma única etapa de filtração por membrana não é satisfatória. Foi aplicada uma sequência de microfiltração, ultrafiltração e nanofiltração no isolamento de componentes bioactivos do extracto de folha de Oliveira. A microfiltração seguida de ultrafiltração removeu as impurezas superiores a 5 kDa., A nanofiltração recuperou os polifenóis e flavonóides antioxidantes e antibacterianos, e o conteúdo do componente principal, oleuropeína (114), no retentato de nanofiltração concentrou-se aproximadamente dez vezes .

Gel de filtração de cromatografia (FGC)

Gel de cromatografia de filtração é também conhecido como gel, cromatografia de permeação ou cromatografia de exclusão de tamanho., As pequenas moléculas têm um tempo de retenção mais longo em GFC do que as grandes moléculas.

Sephadex é formado pelo dextrano de ligação cruzada , e os tipos G de Sephadex foram usados para a separação de compostos hidrofílicos tais como peptídeos, oligossacáridos e polissacáridos .

Sephadex LH20, um derivado hidroxipropilado de Sephadex G25, tem natureza hidrofóbica e hidrofílica. Um mecanismo de adsorção também esteve envolvido na separação utilizando SEPHADEX LH-20. O Sephadex LH-20 pode ser utilizado para a separação de uma grande variedade de produtos naturais em sistemas de solventes aquosos ou não aquosos., Os oligossacáridos de arabinoxilano feruloilados de trigo intermédio de cereais perenes foram bem separados por Sephadex LH-20 utilizando 100% de água como fase móvel . Three new pyrimidine diterpenes, axistatins 1-3(115-117, Fig. 14) juntamente com três formamidas conhecidas (118-120) foram isoladas a partir da fracção activa anti-cancro CH2Cl2 de Agelas axifera sobre colunas Sephadex LH-20 com uma série de sistemas de solventes , seguida de purificação utilizando pré-HPLC .

de Poliacrilamida (bio-gel P) e cross-linked de agarose foram também utilizados na separação de produtos naturais.

A separação baseada na resistência iónica

cromatografia de permuta iónica (IEC) separa moléculas com base nas diferenças na sua carga líquida à superfície. Alguns produtos naturais, como alcaloides e ácidos orgânicos possuindo um grupo funcional capaz de ionização, podem ser separados pela IEC., As moléculas carregadas podem ser capturadas e liberadas pela resina de troca iônica, alterando a força iônica da fase móvel (por exemplo, alterando pH ou concentração de sal). Resinas de troca iônica Cation foram usadas para a separação de alcaloides, enquanto as resinas de troca iônica anion foram usadas para a separação de ácidos orgânicos naturais e fenóis.

as antocianinas carregadas positivamente foram separadas dos compostos polifenólicos neutros no extracto de Frutinidia melanandra (kiwifruit) tratado com Actinidia XAD-7 utilizando resina de permuta iónica Dowex 50WX8 cation ., Feng e Zhao usaram a cromatografia semi-preparativa para separar (-) o galato de epigalocatequina e (−) o galato de epicatequina (122) em extrato de chá bruto com gel ácido fraco à base de polissacáridos CM-Sephadex C-25 . Um novo alcalóide, fumonisina B6 (123), juntamente com um alcalóide conhecido, fumonisina B2 (124), foi isolado pela IEC sobre estratos X-C de resina de troca de catiões em modo misto, seguido de cromatografia de fase reversa do fungo Aspergillus niger nrrl 326 culturas extract .

Outras modernas técnicas de separação

destilação Molecular (MD)

destilação Molecular separa molecular por destilação sob vácuo a uma temperatura muito abaixo do seu ponto de ebulição. É um método de destilação adequado para separar compostos termossensíveis e de elevada massa molecular. Borgarello et al. obtido um timol(125, Fig., 16) fracção de enriquecimento do óleo essencial de orégãos por destilação molecular modelada por Redes Neurais Artificiais. A fracção obtida tinha propriedades antioxidantes e podia estabilizar o óleo de girassol . Três tipos de ftalatos foram efectivamente removidos do óleo de laranja doce por destilação molecular nas condições ideais (temperatura de evaporação de 50 °C, Pressão do evaporador de 5 kPa e um caudal de alimentação de 0,75 ml/min) .

Preparativa cromatografia gasosa (Prep-GC)

a cromatografia gasosa (GC) com alta eficiência de separação e rápido de separação e análise torna, potencialmente, o ideal preparativa método para a separação de compostos voláteis. A porta de injecção, a coluna, o dispositivo de separação e o dispositivo de armação do equipamento GC devem ser modificados para efeitos de separação preparatória devido à falta de pré-GC comercial .Cinco compostos voláteis, nomeadamente o curzereno (98) (6.,6 mg), β-elemeno (100, Fig. 12) (5, 1 mg), curzerenona (126) (41, 6 mg), curcumenol (127) (46, 2 mg) e curcumenona (128) (21, 2 mg) (Fig. 17), foram separados do extrato de metanol de rizoma de Curcuma por pré-GC sobre uma coluna de aço inoxidável com 10% OV-101 (3 m × 6 mm, I. D.) Após 83 injecções simples (20 µl). O pré-GC também foi aplicado para a separação de isômeros naturais. Um total de 178 mg de cis-asarone (129) e 82 mg de trans-asarone (130) foram obtidos a partir do óleo essencial de Acorus tatarinowii após 90 única injeções (5 µl) na mesma coluna acima ., O pré-GC tornou-se um importante método de separação para compostos voláteis naturais; no entanto, uma carga de amostra mais pesada e a coluna de preparação de grande diâmetro utilizada diminuíram a eficiência . Enquanto isso, as desvantagens do pré-GC, incluindo a falta de equipamentos comerciais pré-GC, o consumo de um grande volume de gás transportador, a decomposição de compostos termolábicos sob alta temperatura de operação, as dificuldades de coleta de fração, e baixa produção, ainda restringem o uso do pré-GC.

cromatografia de fluido Supercrítico (SFC)

SFC usa fluido supercrítico como fase móvel. O SFC integra as vantagens da cromatografia líquida e GC, uma vez que os fluidos supercríticos possuem propriedades de alta capacidade de dissolução, alta difusividade e baixa viscosidade, o que permite uma separação rápida e eficiente., Assim, o SFC pode usar uma coluna mais longa e partículas menores da fase estacionária do que o HPLC, que fornece um maior número de placas teóricas e uma melhor separação. O SFC pode ser utilizado para a separação de compostos não voláteis ou termicamente láteis aos quais o GC não é aplicável. Os sistemas SFC são compatíveis com uma ampla gama de diferentes detectores, incluindo os utilizados nos sistemas LC e GC., A polaridade da fase móvel amplamente utilizada, S-CO2, em SFC está perto da polaridade do hexano, com o resultado que SFC foi usado para a separação de produtos naturais não-polares, como ácidos graxos, terpenos e óleos essenciais por muitos anos. Modificadores de eluentes como o metanol e o acetonitrilo aumentam a força de eluição, o que está aumentando o interesse em separar os produtos naturais polares por SFC .Zhao et al. separaram com sucesso três pares de saponinas diastereoméricas espirostanol (131-136, Fig., 18) from the TCM Trigonellae Semen (the seed of Trigonella foenum-graecum) on two CHIRALPAK IC columns in tandem . Yang et al. aplicada SFC para a preparação de separação de dois pares de 7-epimeric spiro oxindole alcalóides (137-140) a partir de caules com ganchos de Uncaria macrophylla (ervas fonte de TCM Uncariae Ramulus Cum Uncis) em um Viridis de Preparação de Sílica 2-EP OBD coluna usando acetonitrilo contendo 0,2% de DEA modificados S-CO2. A fase móvel não aquosa utilizada na SFC impediu a tautomerização dos alcaloides Spiro oxindol separados ., SFC também é aplicado na separação de enantiômeros naturais. (R, S) – goitrina (141-142) é a substância activa do MCT Isatidis Radix. A separação quiral de goitrinas (R) E (S) foi conseguida com sucesso pela pré-SFC em uma coluna IC de Chiralpak usando acetonitrilo como o modificador orgânico .

Molecular impresso tecnologia

Molecular impresso tecnologia tem sido um atrativo método de separação na última década, devido às suas características únicas, incluem alta seletividade, baixo custo e fácil preparação. Muitas cavidades complementares com a memória de tamanho, forma e grupos funcionais das moléculas modelo são geradas quando as moléculas modelo são removidas do polímero impresso molecular (MIP)., Assim, a molécula modelo e seus análogos terão o reconhecimento específico e adsorção seletiva para o PMI. Os MIPs têm sido amplamente utilizados na separação de produtos naturais ou como sorbatos de extracção em fase sólida para a preparação de amostras de materiais à base de plantas para enriquecer os compostos menores.

Ji et al. desenvolveu polímeros com impressão molecular multi-template usando DL-tirosina e ácido fenilpirúvico como as moléculas modelo para separar a dencichina (143, Fig. 19) from the water extract of Panax notoginseng., Tanto a dencichina como a molécula modelo da DL-tirosina (144) contêm um grupo amino (NH2) e um grupo ácido carboxílico (COOH), e a outra molécula modelo, o ácido fenilpirúvico (145), tem um grupo α-ceto (COCOOH) que também pode ser encontrado na estrutura da dencichina . Ma et al. desenvolveu um método de separação preparativa para separar o solanesol (146) das folhas de tabaco por cromatografia flash baseada em MIP., O MIP foi preparado com metacrilato de metilo como o monômero, solanesol como a molécula modelo e dimetacrilato de etileno glicol como o crosslinker por um método de polimerização em suspensão. Um total de 370.8 mg de solanesol com 98.4% de pureza foi separado do extrato de folhas de tabaco, com um rendimento de 2,5% do peso seco de folhas de tabaco . Tu e o al. usou o MIP magnético termorreativo para separar os três principais curcuminóides, curcumina (147), demetoxicurcumina (148) e bisdemetoxicurcumina (149), do rizoma TCM Curcumae Longae (o rizoma de Curcuma longa)., O MIP magnético termorreativo projetado mostrou um bom fator de imprinting para curcuminóides em um intervalo entre 2.4 e 3.1, termorreactividade e separação magnética rápida (5 s) .

Simulated moving bed cromatografia

Simulated moving bed (SMB) cromatografia utiliza várias colunas com fases estacionárias (cama de casal)., O movimento de contracorrente da cama é simulado através de válvulas rotativas, que periodicamente mudam a entrada (alimentação e eluente) e saída (extrato e refinado). O processo SMB é um método de separação contínua e uma ferramenta poderosa para a separação em larga escala de produtos naturais, com a vantagem de menor consumo de solventes ao longo de um período de tempo mais curto.

dois ciclopeptídeos, ciclolinopeptídeos C E E (150-151, Fig., 20), foram obtidos a partir de óleo de linhaça utilizando um SMBC de três zonas com oito colunas esféricas de sílica-gel de fase esférica de HPLC preparadas e utilizando etanol absoluto como dessorbente . Kang et al. desenvolveu um processo SMB tandem constituído por duas unidades SMB de quatro zonas numa série com os mesmos tamanhos de partículas adsorventes no anel I e no anel II para separar o paclitaxel (taxol, 74) (Fig. 11), 13-dehidroxibaccatina III (152), e 10-deacetilpaclitaxel (153). O Paclitaxel foi recuperado na primeira unidade SMB, enquanto o 13-dehidroxibaccatina III e o 10-deacetilpaclitaxel foram separados na segunda unidade SMB ., Mun melhorou este método de cromatografia SMB utilizando adsorvente de diferentes tamanhos de partículas no anel i e no anel II. Fluidos supercríticos também podem ser usados como desorbente na cromatografia SMB. Liang et al. foi aplicado com sucesso dióxido de carbono supercrítico com etanol como dessorbente para um SMB de três zonas para separar o resveratrol (60) (Fig. 9) e emotin (44) (Fig. 4) from a crude extract of the TCM Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix .

Multi-dimensional separação cromatográfica

Os componentes a extrair submetido a separação eram complexas e, geralmente, nenhum composto puro vai ser separada em uma coluna de cromatografia. A separação multidimensional baseada na extração de fase sólida e no acoplamento de múltiplas colunas com diferentes fases estacionárias melhora muito a eficiência de separação., Com mais equipamentos comerciais de separação dimensional múltipla entrando no mercado, a separação de produtos naturais está se tornando mais rápida, eficiente e automatizada.