Tekniikoita louhinta ja eristäminen luonnon tuotteet: kattava arvostelu

komponentit ote mainitut menetelmät ovat monimutkaisia ja sisältää erilaisia luonnon tuotteita, jotka vaativat edelleen erottaminen ja puhdistus saada aktiivinen osa tai puhtaan luonnon tuotteita. Erottelu riippuu yksittäisen luonnontuotteen fysikaalisesta tai kemiallisesta erosta., Kromatografia, erityisesti kolonnikromatografia, on tärkein menetelmä, jolla saadaan kompleksiseoksesta puhtaita luonnontuotteita.

Erottaminen perustuu adsorptio-ominaisuudet

Adsorptio pylväskromatografiaa käytetään laajalti erottaminen luonnon tuotteiden, erityisesti alkuperäisen erottaminen vaiheessa, koska sen yksinkertaisuus, korkea kapasiteetti ja alhaiset kustannukset adsorbentit, kuten silikageeliä ja makrohuokoisen hartsin. Erottelu perustuu adsorbenttien pinnan luonnontuotteiden adsorptioaffiniteettien eroihin., Valinta adsorbentit (stationäärifaasi) sekä liikkuva faasi on tärkeää saavuttaa hyvä erottaminen luonnollisia tuotteita, maksimoida elpyminen kohde yhdisteitä ja välttää peruuttamattomia adsorptio kohde yhdisteitä päälle adsorbentteja.

silikageeli on yleisimmin käytetty adsorbentti phytochemical tutkimus. Arviolta lähes 90% fytokemikaalien erotuksesta (preparatiiviasteikko) perustui silikageeliin. Silikageeli on polaarinen imukykyinen silanoliryhmien kanssa. Molekyylit säilyvät silikageelillä vetysidosten ja dipoli–dipolien yhteisvaikutusten kautta., Näin polaariset luonnontuotteet säilyvät pidempään silikageelikolonneissa kuin ei-polaariset. Joskus tietyt polaariset luonnontuotteet saattavat kokea peruuttamatonta kemisorptiota. Silikageelin deaktivointi lisäämällä vettä ennen käyttöä tai käyttämällä vettä sisältävää liikkuvaa vaihetta heikentää adsorptiota. Vakavia pyrstön voi ilmetä, kun erottamalla alkaloideja silikageelin päällä, ja lisäksi pieni määrä ammoniakkia tai orgaanisia amiineja, kuten trietyyliamiinia voi vähentää pyrstön., Kaksitoista metyylikanofrutikosinaattiryhmään kuuluvaa alkaloidia, mukaan lukien kuusi uutta alkaloidia, prunifoliinit A–F (68-73, Kuva. 11), saatiin lehtiä Kopsia arborea alkuperäistä silikageeliä sarakkeen kromatografia käyttäen kaltevuus MeOH–CHCl3 mobiili vaiheen jälkeen keskipako TLC käyttämällä ammoniakkia tyydyttyneitä Et2O–heksaani tai EtOAc/heksaani-järjestelmissä, kuten eluentti .

Alumiinioksidia (alumiinioksidi) on vahva polar adsorbentti käytetään erottaminen luonnollisia tuotteita, erityisesti erottaminen alkaloideja. Vahva positiivinen alalla Al3+ ja perus sivustoja alumiinioksidin vaikuttavat helposti polarisoitunut yhdisteitä johtaa adsorptio alumiinioksidin, että on erilainen alkaen että silikageeliä., Soveltaminen alumiinin erottaminen luonnon tuotteita on vähentynyt merkittävästi viime vuosina, koska se voi katalysoida kuivuminen, hajoaminen tai isomerointi aikana erottaminen. Zhang ja Su raportoitu kromatografia-protokollaa käyttäen perus alumiinioksidin erottaa taxol (74, Kuva. 11) Taxus cuspidate callus-kulttuurien uutteesta ja totesi taxolin takaisinperinnän olleen yli 160%. He havaitsivat, että kasvu taxol tuli isomerointi 7-epi-taxol (75) katalysoivat alumiinioksidia., Todettiin myös, että pieni määrä taxol voisi olla hajonnut baccatin III (76) ja 10-deacetylbaccatin III (77) alumiinioksidin sarakkeessa . Edelleen tutkimuksen erottaminen taxol on hapan, neutraali ja perus alumiinioksidin ilmoitti, että Lewis souci ja perus aktiivisuus ydintä pinnalle alumiinioksidin aiheuttama isomerointi 7-epi-taksolia taxol .

kromatografiassa käytettävien polyamidien rakenteet sisältävät sekä akryyli-että amidiryhmiä., Hydrofobinen ja / tai vetysidoksen vuorovaikutus tapahtuu polyamidikolonnikromatografiassa liikkuvan faasin koostumuksesta riippuen. Kun polar liuottimia, kuten vesipitoiset liuottimet käytetään mobiili vaihe, polyamidia toimia pooliton stationäärifaasi ja kromatografia käyttäytyminen on samanlainen käänteisfaasi-kromatografiaa. In kontrasti, polyamidia toimivat polar stationäärifaasin ja kromatografia käyttäytyminen on samanlainen kuin normaali vaihe kromatografia., Polyamidi sarakkeen kromatografia on tavanomainen työkalu erottaminen luonnollinen polyfenolit myös antrakinoneja, fenoliset hapot ja flavonoidit, jonka mekanismit ovat katsoneet vetysidoksen muodostumisen välillä polyamidi absorboimisaineet, liikkuvan faasin ja kohde-yhdisteitä. Gao ym. tutkittu polyfenolien kromatografiakäyttäytymistä, mukaan lukien fenolihapot ja flavonoidit polyamidikolonnissa. Todettiin, että polyamidi toimi vety bond tunnustaja, ja numerot fenolisten hydroxyls ja niiden asema molekyyli vaikuttaa vahvuus adsorptio ., Polyfenolien lisäksi raportoitiin myös muuntyyppisten luonnontuotteiden erottaminen polyamidikolonnikromatografialla. Kuqingchan kokonaissaponiineja voidaan rikastuttaa polyamidikolonnikromatografialla, joka alensi merkittävästi SHR-rotan systolista painetta . Käyttämällä sekoitus dikloorimetaani ja metanoli on kaltevuus kuin eluentti, seitsemän suurta isokinoliini alkaloideja Rhizoma Coptidis mukaan berberiini (39), coptisine (40), palmatine (41), jatrorrhizine (42), columbamine (78), groenlandicine (79) (Fig. 4), ja magnofloriini (80, Kuva., 11) erotettiin yksivaiheisessa polyamidikolonnikromatografiassa .

Adsorptiivinen makrohuokoinen hartsit ovat polymeeri adsorbentit kanssa makrohuokoinen rakenteita, mutta ilman ion exchange-ryhmiä, jotka voivat valikoivasti imeytyy lähes mitä tahansa luonnontuotteita. He ovat laajalti käytetään joko itsenäisenä järjestelmänä tai osana esikäsittely prosessi poistaa epäpuhtauksia tai rikastuttava kohde yhdisteitä, koska niiden etuja, jotka ovat adsorptive kapasiteetti, suhteellisen alhaiset kustannukset, helppo uudistumista ja helppo skaalata., Se adsorptiivinen mekanismeja adsorptiivinen makrohuokoisen hartsin ovat sähköstaattiset voimat, vetysidokset, monimutkainen muodostumista ja koko-seulonnan toimien välillä hartsit ja luonnontuotteet in ratkaisu. Pinta-ala, huokoshalkaisija ja napaisuus ovat keskeisiä tekijöitä, jotka vaikuttavat hartsien kapasiteettiin . 20 (S)-protopanaksatriolipaponiinit (PTS) (81) ja 20 (S)-protopanaksadiolipaponiinit (PDS) (82, Kuva. 11) tunnetaan kaksi suurta bioaktiivisia komponentteja root Panax notoginseng., PTS ja PDS erotettiin onnistuneesti 30%: lla (v/v) etanolin vesiliuoksista d101-makroporihartsikolonnista. Toimintaperiaatteet käyttäytymistä PDS ja PTS olivat lähellä käänteisfaasi-kromatografia, kun verrataan kromatografinen profiilit makrohuokoinen hartsi sarakkeen kromatografia HPLC-kromatogrammi on Zorbax SB-C18-sarakkeessa . Viime aikoina, Meng et al. saatu Panacis Japonici Rhizoma (Pjrs) – kasvin saponiinien kokonaismäärästä D101-makrohartsin avulla., Sisällön neljä suurta saponiinit, chikusetsusaponins V (55), IV (56) ja IVa (57), ja pseudoginsenoside rt1 ympäristövastuu (58) (Fig. 8), Saatu PJRS oli yli 73%. PJRS toimi Panacis Japonici Rhizoman laadunvalvonnan vakioviittauksena . Jotkut tutkijat olettivat, että pääasiallinen adsorptiivinen mekanismi välillä makrohuokoisen hartsin ja polyfenolit liittyi vetysidoksen muodostumisen välillä happea atom eetteri bond hartsi-ja vety-atomin fenolisten hydroksyyli-ryhmä fenoli., Liuoksen pH-arvo vaikutti merkittävästi vetysidoksen vuorovaikutusvoimaan .

hopeanitraatti on toinen hyödyllinen kiinteä tuki luonnontuotteiden erottamisessa. Nämä π-elektroneja sisältävät luonnontuotteet vuorovaikuttavat palautuvasti hopeaionien kanssa muodostaen polaarisia komplekseja. Mitä suurempi on luontaistuotteen kaksoissidosten tai aromatiikan määrä, sitä voimakkaampi kompleksoituminen on. Hopeanitraatti kyllästetään tyypillisesti silikageelillä (SNIS) tai alumiinioksidilla erottamista varten. Useat tutkimusryhmät raportoivat rasvahappojen erottelusta SNIS: ssä . Wang ym., ilmoitettu zingibereenin eristämisestä inkiväärioleoresiinista SNIS-kolonnikromatografialla . Pari isomeeriä, brasilieenihappo (83, viikuna. 11) ja isobrasilieenihappo (84) erotettiin Calophyllum brasiliensesta Lemos et al. SNIS-kolumnissa . Jotkut tutkimusryhmät myös soveltaa hopeanitraatti kaksi-vaihe järjestelmä korkea-nopeus vastavirta-kromatografia (HSCCC) parantaa erottaminen. Ksantokymoli (85) ja guttiferoni E (86) ovat agno3-HSCC: n Garcinia xanthochymus-bakteerin π-bond-bentsofenoni-isomeeripari., Eluutiojärjestys ja π-sidos isomeerit tässä AgNO3-HSCCC erottaminen on sisäinen π-sidos (aiemmin) < terminaali, joka on samanlainen kuin havaittiin SNIS sarakkeen kromatografia .

Erottaminen perustuu jakautumiskerroin

– Osio kromatografia (PC) seuraa neste–neste-uutto periaate perustuu suhteellinen liukoisuus kaksi eri sekoittumattomasta nesteitä. Alkuvaiheessa yksi nestefaasi päällystettiin kiinteäksi matriisiksi (silikageeli, hiili, selluloosa jne.) liikkuvana vaiheena käytettiin stationäärifaasia ja toista nestefaasia., Helposti poistettavan stationäärifaasin haitta ja korjaamattomat tulokset ovat johtaneet siihen, että tällaista PC: tä käytetään nykyään harvoin. Vapaakauppa-vaihe, jossa nestemäinen stationäärifaasi on sidottu kemiallisesti inertin tukea, jota käytetään stationäärifaasin voittaa ne haitat. Kaupallisesti saatavilla alkyyli kuten C8-ja C18 -, aryyli -, syano-ja amino korvata silanes käytetään usein sidottu vaiheeseen, jotka ovat laajalti käytetty erottaa erilaisia luonnon tuotteita, erityisesti lopullinen puhdistus vaihe.

kolme PTS (notoginsenosidi R1 (87) (Kuva., 11), ginsenosides Rg1 (55) (Kuva. 8)ja Re (88) (Kuva. 11)) ja kaksi PDS (Kuva. 3) erotettiin hyvin C18–sarakkeessa käyttäen etoh-H2O-järjestelmää mobiilivaiheena . Cai et al syntetisoi uuden polyakryyliamidipohjaisen piidioksidin stationäärifaasin. ja oli onnistuneesti soveltaa erottaminen galakto-ja saponiinit Pariisin polyphylla kanssa EtOH–H2O mobiili vaiheessa .

vastavirtakromatografia (CCC) on eräänlainen PC, joka pitää nestemäisen stationäärifaasin painovoiman tai keskipakovoiman avulla., CCC on harvoin käytetty varhaisessa vaiheessa, koska sen huono paikallaan pysymistä, pitkä erottaminen aikaa ja työvoimavaltaista prosessi. CCC: tä parannettiin kuitenkin merkittävästi 1980-luvulla, jolloin kehitettiin nykyaikainen CCC, mukaan lukien HSCC ja keskipakoisjakautumiskromatografia (CPC). HYDRODYNAAMISILLA CCC-järjestelmillä, kuten HSCCC: llä, on planeetan pyörimisliike kahden pyörivän akselin ympärillä ilman pyöriviä tiivisteitä, mikä tarjoaa matalapaineen pudotusprosessin. Hydrostaattinen CCC, esim.,- , keskipako-osio kromatografia, käyttää vain yksi pyörivä akseli, ja se on sarja toisiinsa chambers ansaan stationäärifaasin joka tarjoaa korkeampi säilyttäminen stationäärifaasin ja korkeampi järjestelmän paine kuin HSCCC. CPC: n korkea järjestelmäpaine estää erottelukyvyn parantamisen lisäämällä sarakkeen pituutta. Korkean suorituskyvyn CCC (HPCCC) edustaa uuden sukupolven hydrodynaaminen CCC ja toimii samalla tavalla kuin HSCCC, mutta paljon suurempi g-tasolla., Se HPCCC välineitä tuottaa yli 240 g, kun taas varhainen HSCCC laitteiden antoi g-taso on alle 80 g. HPCCC lyhentää erottaminen aikaa alle tunti verrattuna useita tunteja edellisen HSCCC ja voi saavuttaa vähintään kymmenen kertaa läpijuoksu on HSCCC väline ., Verrattuna tavanomaiseen sarakkeen erottaminen menetelmää käyttäen kiinteän stationäärifaasin, sekä hydrostaattinen ja hydrodynaaminen CCC järjestelmät tarjoavat joitakin etuja, mukaan lukien poistaminen peruuttamattomia adsorptio-ja huippu seuraa, korkea kantavuus, korkea näyte hyödyntämistä, vähäinen riski näytteen denaturointi ja alhainen liuottimien kulutus. CCC: n rajoitus on, että se erottaa yhdisteet vain suhteellisen kapeassa napaisuusikkunassa. Viimeisten 20 vuotta, HSCCC, HPCCC ja CPC herättänyt suurta huomiota erottaminen tieteen ja on käytetty laajalti erottaminen luonnon tuotteita., Tang ym. kehittynyt HSCCC menetelmää käyttäen kahden faasin liuottimen järjestelmä, joka sisältää etyyli-asetaatti–n-butanoli–etanoli–vesi (4:2:1.5:8.5 v/v/v/v) erottaa kuusi flavone C-glykosidit (89-94, Fig. 12), mukaan lukien kaksi uutta yhdistettä Lophatherum gracilesta . HSCCC, HPCCC ja CPC on myös sovellettu menestyksekkäästi erottaminen haihtuva öljy, josta on vaikea erottaa, kautta perinteisen sarakkeen kromatografia., Kuusi haihtuvia yhdisteitä (curdione (95), curcumol (96), germacrone (97), curzerene (98), 1,8-sineolia (99) ja β-elemene (100)) oli eristetty CPC päässä eteerinen öljy Curcuma wenyujin käyttäen vedettömistä kaksi-vaihe liuotin järjestelmä, joka koostuu petrolieetteriin–asetonitriili–asetoni (4:3:1 v/v/v) ., Neljä suurta sesquiterpenoids (ar-turmerone (101), α-turmerone (102), β-turmerone (103), ja E-atlantone (104)) vastaavia rakenteita oli erotettu eteerinen öljy Curcuma longa yhden HSCCC ajaa käyttämällä kaksi-vaihe liuotin järjestelmä, joka koostuu n-heptaani–etyyliasetaatti–asetonitriili–vesi (9.5/0.5/9/1 v/v) ja kukin yhdiste saavuttaa yli 98% puhtaus . Linalool (105), terpinen-4-olia (106), α-terpineoli (107), s-anisaldehyde (108), anetolin (109) ja foeniculin (110) olivat onnistuneesti eristetty eteerinen öljy Pimpinella anisum, jonka HPCCC käyttäen asteittainen kaltevuus eluointi ., Li et al. kehitetty CPC-menetelmä erottaminen patchouli alkoholia (111), jossa vedettömistä eetteri–asetonitriili (1:1, v/v) liuotin järjestelmä. Yli 2 g patchouli-alkoholia, jonka puhtausaste oli yli 98%, eristettiin 12,5 g eteeristä öljyä 240 ml: n kolonnissa . Suuri tilavuus (useita litroja) sarake on hyväksytty kaupallinen hydrostaattinen CCC ja hydrodynaaminen CCC laitteet pilotti/teollisuuden mittakaavassa erottaminen. Kauppasalaisuuden vuoksi ilmoituksia saatiin vain vähän. On vaikea arvioida, onko hydrostaattinen vai hydrodynaaminen CCC parempi teollisissa sovelluksissa., Käyttäjät voivat valita erityyppisiä CCC-instrumentteja eri tarkoituksiin. Kun stationäärifaasi on huonosti säilytetty hydrodynaaminen CCC, koska korkea viskositeetti ja pieni tiheys erot mobiili-ja kiinteän faasin, hydrostaattinen CCC on enemmän käytännön kuin hydrodynaaminen CCC, koska säilyttämistä paikallaan vaiheen hydrostaattinen CCC on vähemmän herkkä fysikaaliset ominaisuudet neste-järjestelmiä ja on korkeampi säilyttäminen paikallaan vaiheeseen., Kun stationäärifaasi on hyvin säilytetty hydrodynaaminen CCC, suurempi erotusteho on saatu hydrodynaaminen CCC kuin hydrostaattinen CCC samalla neste-järjestelmän ja vastaavan sarakkeen määriä, koska hydrostaattinen CCC on suhteellisen pieni osio tehokkuutta, koska rajoitetun aste sekoitus, ja hydrodynaaminen järjestelmä tarjoaa tehokkaan sekoituksen tuotto korkea osio tehokkuutta.

Erottelu perustuu molekyylien kokoon

erottaminen luonnon tuotteita kalvosuodatuksella (MF) tai geeli, suodatus, kromatografia (GFC) perustuu niiden molekyylien kokoa.

– Kalvo suodatus (MF)

MF puoliläpäisevä kalvo mahdollistaa pienemmät molekyylit läpi ja säilyttää suurempia molekyylejä., MF luonnon tuotteita voisi luonnehtia avulla: mikro -, ultrasuodatus, ja nanofiltration perustuu huokosten koko kalvo levitetään.

– Kalvo suodatus on tehokas työkalu keskittymistä, selkeyttää ja epäpuhtauksien poisto laboratoriossa, sekä elintarvike-ja lääketeollisuudessa. Fenolien kokonaispitoisuus (338%), klorogeenihappo (66) (Kuva. 10) (483%), teobromiini (112, Kuva., 13) (323%), kofeiini (113) (251%), kondensoituneet tanniinit (278%) ja saponiineihin (211%) vuonna vesiuute Ilex paraguariensis olivat huomattavasti kasvoi nanofiltration . Kytkentäkalvosuodatus levitetään, kun yksi kalvosuodatusvaihe ei ole tyydyttävä. Sekvenssin avulla: mikro -, ultrasuodatus ja nanofiltration oli sovellettu eristäminen bioaktiivisia komponentteja oliivi lehtiuutteen. Mikrosuodatus ja sen jälkeen ultrasuodatus poistivat yli 5 kDa: ta suuremmat epäpuhtaudet., Nanofiltration talteen antioksidanttisia ja antibakteerisia polyfenoleja ja flavonoideja, ja sisällön tärkeä osa, oleuropein (114), kun nanofiltration retentate oli keskittynyt noin kymmenen kertaa .

Geeli suodatus, kromatografia (GFC)

Geeli suodatus, kromatografia tunnetaan myös geelipermeaatiokromatografia tai size exclusion chromatography., Pienillä molekyyleillä on GFC: ssä pidempi retentioaika kuin suurilla molekyyleillä.

Sephadex muodostuu ristin-toisiinsa dekstraani, ja G-tyyppisiä Sephadex käytettiin erillään hydrofiilisiä yhdisteitä, kuten peptidejä , oligosakkaridit ja polysakkaridit .

Sephadex LH20, sephadex G25: n hydroksipropyloitu johdannainen, on sekä hydrofobinen että hydrofiilinen. Adsorptiomekanismi oli mukana myös sephadex LH-20: n erottamisessa. Sephadex LH-20: tä voidaan käyttää erilaisten luonnontuotteiden erottamiseen joko vesipitoisessa tai muussa liuottimessa., Se feruloylated arabinoksylaani oligosakkarideja monivuotinen vilja väli vehnä oli hyvin erotettu Sephadex LH-20 avulla 100% vettä kuin liikkuva faasi . Kolme uutta pyrimidiiniditerpeenia, aksistatiinit 1-3 (115-117, Kuva. 14) sekä kolme tunnettua formamides (118-120) oli eristetty anti-syöpä aktiivinen Ch2ci2 osa Agelas axifera yli Sephadex LH-20 palstoja sarjan liuotin järjestelmiä , jonka jälkeen puhdistus käyttäen Prep-HPLC .

Polyakryyliamidia (bio-gel P) ja silloitettu agaroosia käytettiin myös erottaminen luonnon tuotteita.

Erottaminen perustuu ionic strength

Ion-exchange chromatography (IEC) erottaa molekyylejä, jotka perustuvat erot niiden yhteenlaskettu pinta-johtoon. Jotkin luonnontuotteet, kuten alkaloidit ja orgaaniset hapot, joilla on ionisaatioon kykenevä funktionaalinen ryhmä, voitaisiin erottaa IEC: stä., Varatut molekyylit voitiin pyydystää ja vapauttaa ioninvaihtohartsilla muuttamalla liikkuvan faasin ionivahvuutta (esim.pH-tai suolapitoisuutta). Kationi ioninvaihtohartsien käytettiin erottaminen alkaloideja, kun anioni ioninvaihtohartsien käytettiin erottaminen luonnon orgaanisia happoja ja fenolit.

positiivisesti varautuneita antosyaanit olivat erotettu neutraali polyfenolisia yhdisteitä XAD-7 käsitellään Actinidia melanandra hedelmiä (kiivi) pura käyttäen Dowex 50WX8 kationi ion exchange-hartsi ., Feng ja Zhao käyttää semi-preparatiivinen kromatografia erota (−)epigallocatechin-gallate ja (−)epicatechin-gallate (122) teetä raaka-uute kanssa polysakkaridi-pohjainen heikosti hapan geeli CM-Sephadex C-25 . Uusi alkaloidi, fumonisiini B6 (123), yhdessä tunnettu alkaloidi, fumonisiini B2 (124), oli eristetty IEC yli Kerrostumissa X-C-mixed-mode RP-cation exchange resin jälkeen reverse-phase kromatografia sieni Aspergillus niger NRRL 326 kulttuurien ote .

Muut modernin erottaminen tekniikoita

molekyylitislauksella (MD)

molekyylitislauksella erottaa molekyyli tislaamalla alipaineessa lämpötila huomattavasti alle sen kiehumispiste. Se on sopiva tislausmenetelmä lämpöherkän ja suurimolekyylipainoisten yhdisteiden erottamiseen. Borgarello ym. saatu tymoli (125, Kuva., 16) rikastus osa oregano eteerinen öljy molekyylitislauksella mallinnetaan neuroverkkoja. Saadulla fraktiolla oli antioksidanttisia ominaisuuksia ja se saattoi vakauttaa auringonkukkaöljyä . Kolme erilaista ftalaatit olivat tehokkaasti poistaa makea oranssi öljy molekyylitislauksella alle optimaaliset olosuhteet (haihtuminen lämpötila on 50 °C, höyrystimen paine 5 kPa ja rehun virtaus 0,75 ml/min) .

Valmentavaan kaasukromatografia (Prep-GC)

kaasukromatografia (GC) kanssa korkea erotuskyky ja nopea erottaminen ja analysointi tekee siitä mahdollisesti ihanteellinen valmentavaan menetelmä erottaminen haihtuvia yhdisteitä. Injektio satama -, sarake-split-laitteen ja ansa laite GC laitteet on muunnettu valmentavaan erottaminen puutteen vuoksi kaupallinen Prep-GC .

viisi haihtuvaa yhdistettä eli curzereeni (98) (6.,6 mg), β-alkuaine (100, Kuva. 12) (5, 1 mg), curzerenone (126) (41.6 mg), curcumenol (127) (46.2 mg), ja curcumenone (128) (21.2 mg) (Fig. 17), olivat erotettu metanoli ote Kurkuma Juurakosta, jonka Prep-GC yli ruostumaton teräs sarake täynnä 10% OV-101 (3 m x 6 mm, olen.d.) kun 83 yhden pistoksen (20 µl) . Prep-GC: tä sovellettiin myös luonnollisten isomeerien erottamiseen. Yhteensä 178 mg ivy-asarone (129) ja 82 mg trans-asarone (130) oli saatu eteerinen öljy Acorus tatarinowii jälkeen 90 yhden pistoksen (5 µl) samassa sarakkeessa kuin ennen ., Prep-GC on tullut tärkeä erottelu menetelmä luonnollisia haihtuvia yhdisteitä; kuitenkin, raskaampaa näytteen kuormitus ja suuri halkaisija valmentavaan sarake palveluksessa vähentynyt tehokkuutta . Samaan aikaan, haitat Prep-GC, mukaan lukien puute kaupallinen Prep-GC laitteet, kulutus suuri määrä kantajakaasu, hajoaminen thermolabile yhdisteitä alle korkea käyttölämpötila, vaikeudet murto-kokoelma, ja tuotanto on vähäistä, vielä rajoittaa käyttöä Prep-GC.

Ylikriittinen kromatografia (SFC)

SFC käyttää ylikriittinen kuin liikkuva faasi. SFC integroi edut sekä GC-ja nestekromatografia (LC) kuin ylikriittinen nesteitä hallussaan ominaisuuksia korkea liuottamalla kyky, korkea diffuusion ja alhainen viskositeetti, joka mahdollistaa nopean ja tehokkaan erottaminen., Siten SFC voi käyttää enää sarakkeessa ja pienempiä hiukkasia stationaarifaasin kuin HPLC, joka tarjoaa enemmän teoreettinen levyt ja erottaa paremmin toisistaan. SFC: tä voidaan käyttää haihtumattomien tai termisesti labiilien yhdisteiden erottamiseen, joihin GC ei sovellu. SFC-järjestelmät ovat yhteensopivia monien erilaisten ilmaisimien kanssa, myös LC-ja GC-järjestelmissä käytettävien ilmaisimien kanssa., Napaisuus laajalti käytetty mobiili vaihe, S-CO2, SFC on majoitusliike, napaisuus heksaani, sillä seurauksella, että SFC käytettiin erottaminen ei-polar luonnollisia tuotteita, kuten rasvahappoja, terpeenit ja eteeriset öljyt monta vuotta. Eluentti määritteet, kuten metanoli ja asetonitriili parantaa eluointi voimaa, joka on kasvava kiinnostus erottaa polar luonnollisia tuotteita, joita SFC .

Zhao et al. erotti onnistuneesti kolme paria 25 R/S diastereomeerista spirostanolipaponiinia (131-136, Kuva., 18) mistä TCM Siemennesteen Trigonellae (siemen Trigonella foenum-graecum) on kaksi CHIRALPAK IC sarakkeet yhdistettynä samanaikaisesti . Yang ym. soveltaa SFC, sillä valmentavaan erottaminen kaksi paria 7-epimeric spiro oxindole alkaloideja (137-140) päässä varret ja koukut Uncaria macrophylla (kasviperäinen lähde TCM Uncariae Ramulus Cum Uncis) on Viridis Prep Piidioksidi 2-EP OBD-sarake käyttäen asetonitriiliä sisältävä 0.2% DEA muutettu S-CO2. SFC: ssä käytetty ei-vesipitoinen liikkuva faasi esti erotettujen spiro-oksindolialkaloidien tautomeroitumisen ., SFC: tä käytetään myös luonnollisten enantiomeerien erottamisessa. (R, S) – goitrin (141-142) on TCM Isatidis Radixin vaikuttava aine. Se kiraalinen erottaminen (R) ja (S) goitrins oli onnistuneesti saavuttaa prep-SFC on Chiralpak IC sarake käyttäen asetonitriiliä kuin orgaaninen muokkaaja .

Molekyyli on painettu teknologia

Molekyyli on painettu teknologia on ollut houkutteleva erottaminen menetelmä viime vuosikymmenen aikana, koska sen ainutlaatuisia ominaisuuksia, jotka ovat korkea valikoivuus, alhaiset kustannukset ja helppoa valmistelu. Monia toisiaan täydentäviä onteloita muistin koko, muoto, ja toiminnalliset ryhmät mallin molekyylejä syntyy, kun malli molekyylit poistetaan molekyyli polymeeri painettu (MIP)., Näin mallimolekyylillä ja sen analogeilla on erityinen tunnistus ja selektiivinen adsorptio MIP: lle. MIPs on käytetty laajalti erottaminen luonnon tuotteita tai solid-phase extraction imeytysaineita näytteen valmisteluun kasviperäisten aineiden rikastuttaa pieniä yhdisteitä.

Ji et al. kehittynyt multi-malli molekyylisesti painettu polymeerit käyttämällä L-tyrosiini ja phenylpyruvic happo malli molekyylejä erottaa dencichine (143, Fig. 19) Panax notoginsengin vesiuutteesta., Molemmat dencichine ja malli molekyyli L-tyrosiini (144) sisältää amino – (NH2) ryhmä ja karboksyylihappo (COOH) ryhmä, ja toinen malli molekyyli, phenylpyruvic happo (145), on α-keto happo (COCOOH) ryhmä, joka löytyy myös rakenteen dencichine . Ma ym. kehitti valmistavan erotusmenetelmän, jolla solanesoli (146) erotettiin tupakanlehdistä flash-kromatografialla MIP: n perusteella., MIP oli valmistettu metyylimetakrylaatti kuin monomeerin, solanesol kuin malli molekyyli ja ethylene glycol dimethacrylate kuin crosslinker, jonka jousitus polymerointi menetelmä. Tupakanlehtien uutteesta erotettiin yhteensä 370,8 mg solanesolia, jonka puhtausaste oli 98,4% ja jonka tuotto oli 2,5% tupakanlehtien kuivapainosta . Sinä ja muut. käytetty thermo-herkkä magneettinen MIP erottaa kolme suurta curcuminoids, curcumin (147), demethoxycurcumin (148), ja bisdemethoxycurcumin (149), mistä TCM Curcumae Longae Rhizoma (juurakosta Kurkuma longa)., Suunniteltu thermo-herkkä magneettinen MIP osoitti hyvää merkinnän tekijä curcuminoids välillä 2.4 ja 3.1, thermo-reagointikykyä ja nopea magneettinen erottaminen (5 s) .

Simuloitu liikkuva sänky kromatografia

Simuloitu liikkuva sänky (SMB) kromatografia käyttää useita palstoja paikallaan vaiheet (sänky)., Vastavirtaan liikkuminen sänky on simuloitu kautta pyörivät venttiilit, jotka säännöllisesti vaihtaa sisääntulo (rehu-ja eluentti) ja ulostulon (pura ja ssa). SMB-prosessi on jatkuva erottaminen menetelmä ja tehokas työkalu suurten erottaminen luonnon tuotteita, joiden etuna pienempi liuottimien kulutus on yli lyhyemmässä ajassa.

kaksi syklopeptidiä, syklolinopeptidit C ja E (150-151, Kuva., 20), saatiin pellavansiemenöljy käyttäen kolmen vyöhykkeen SMBC kahdeksan preparatiivinen HPLC-normaali vaihe pallomaisia silikageeli sarakkeet ja käyttää absoluuttista etanolia kuin desorbent . Kang ym. kehitetty yhdessä SMB-prosessi, joka koostuu kaksi neljä-vyöhykkeen SMB-yksikköä sarjassa samalla adsorbentti hiukkasten koot kehä I ja kehä II erillinen paklitakseli (taxol, 74) (Fig. 11), 13-dehydroksibakcatin III (152) ja 10-deasetyylipaklitakseli (153). Paklitakseli saatiin talteen ensimmäisessä SMB-yksikössä, kun taas toisessa SMB-yksikössä eroteltiin 13-dehydroksibakcatin III ja 10-deasetyylipaklitakseli ., Mun paransi tätä SMB-kromatografiamenetelmää käyttämällä eri hiukkaskokoja adsorbenttia kehässä I ja kehässä II . Ylikriittisiä nesteitä voidaan käyttää myös desorbenttina SMB-kromatografiassa. Liang ym. käytetään menestyksekkäästi ylikriittistä hiilidioksidia etanolin kanssa kolmen vyöhykkeen SMB: n desorbenttina resveratrolin (60) erottamiseksi (Kuva. 9) ja emodin (44) (Kuva. 4) raakaöljyn ote TCM Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix .

moniulotteinen kromatografinen erottaminen

komponentit ote kohdistuu erottaminen oli monimutkainen, ja yleensä, ei puhdas yhdiste erottaa yhden sarakkeen kromatografia. Moniulotteinen erottelu perustuu kiinteäfaasiuuttoa ja kytkin useita palstoja eri kiinteän faasin suuresti parantaa erotusteho., Enemmän kaupallinen useita ulotteinen erottaminen laitteet tulevat markkinoille, erottaminen luonnon tuotteita on yhä nopea, tehokas ja automatisoitu.