tekniker för extraktion och isolering av naturliga produkter: en omfattande översyn

komponenterna i extraktet från ovanstående metoder är komplexa och innehåller en mängd olika naturliga produkter som kräver ytterligare separation och rening för att erhålla den aktiva fraktionen eller rena naturliga produkter. Separationen beror på den fysiska eller kemiska skillnaden hos den enskilda naturprodukten., Kromatografi, särskilt kolonn kromatografi, är den huvudsakliga metoden som används för att erhålla rena naturliga produkter från en komplex blandning.

Separation baserad på adsorptionsegenskaper

Adsorptionskolonnkromatografi används ofta för separation av naturliga produkter, särskilt i det inledande separationssteget, på grund av dess enkelhet, hög kapacitet och låga kostnader för adsorbenter som kiselgel och makroporösa hartser. Separationen baseras på skillnaderna mellan adsorptionsaffiniteterna hos de naturliga produkterna för adsorbenternas yta., Valet av adsorbenter (stationär fas) samt mobilfasen är avgörande för att uppnå god separation av naturliga produkter, maximera återhämtningen av målföreningar och undvika irreversibel adsorption av målföreningar på adsorbenterna.

kiselgel är den mest använda adsorbenten i fytokemisk undersökning. Det uppskattades att nästan 90% av fytokemisk separation (preparativ skala) baserades på kiselgel. Kiselgel är ett polärt absorberande medel med silanolgrupper. Molekyler behålls av kiselgel genom vätebindningar och dipol-dipol interaktioner., Således behålls polära naturliga produkter längre i kiselgelkolumner än icke-polära. Ibland kan vissa polära naturprodukter genomgå irreversibel kemisorption. Avaktiveringen av kiselgel genom tillsats av vatten före användning eller användning av en vattenhaltig mobil fas kommer att försvaga adsorptionen. Allvarlig tailing kan uppstå när man separerar alkaloider på kiselgel, och tillsatsen av en liten mängd ammoniak eller organiska aminer som trietylamin kan minska tailing., Tolv alkaloider som tillhör metyl chanofruticosinate gruppen inklusive sex nya alkaloider, prunifolines A–F (68-73, Fig. 11), har erhållits från blad av Kopsia arborea av första silica gel kolonnkromatografi använda gradient MeOH–CHCl3 som mobil fas följs av centrifugal TLC med hjälp av ammoniak mättade Et2O–hexan eller EtOAc/hexan system som elueringsmedel .

aluminiumoxid (aluminiumoxid) är en stark polär adsorbent som används vid separation av naturliga produkter, särskilt vid separation av alkaloider. Det starka positiva fältet av Al3 + och de grundläggande platserna i aluminiumoxid som påverkar lättpolariserade föreningar leder till adsorptionen på aluminiumoxid som skiljer sig från den på kiselgel., Tillämpningen av aluminiumoxid i separationen av naturliga produkter har minskat avsevärt under de senaste åren eftersom det kan katalysera uttorkning, sönderdelning eller isomerisering under separation. Zhang och Su rapporterade ett kromatografiskt protokoll med hjälp av grundläggande aluminiumoxid för att separera taxol (74, Fig. 11) från extrakt av Taxus cuspidate förhårdnader kulturer och fann återvinning av taxol var mer än 160%. De fann att ökningen av taxol kom från isomeriseringen av 7-epi-taxol (75) katalyserad av alumina., Det konstaterades också att en liten mängd taxol kunde sönderdelas till baccatin III (76) och 10-deacetylbaccatin III (77) i aluminakolonnen . Ytterligare undersökning av separationen av taxol på sur, neutral och grundläggande aluminiumoxid indikerade att Lewis souci och de grundläggande aktivitetskärnorna på ytan av aluminiumoxid inducerade isomeriseringen av 7-epi-taxol till taxol .

de strukturer av polyamider som används i kromatografi innehåller både akryl-och amidgrupper., Hydrofob och / eller vätebindningsinteraktion kommer att ske i polyamidkolonnkromatografi beroende på sammansättningen av den mobila fasen. När polära lösningsmedel såsom vattenhaltiga lösningsmedel används som den mobila fasen, fungerar polyamider som den icke-polära stationära fasen och kromatografibeteendet liknar omvänd fas kromatografi. I kontrast fungerar polyamiderna som den polära stationära fasen och kromatografibeteendet liknar normal faskromatografi., Polyamidkolonnkromatografi är ett konventionellt verktyg för separation av naturliga polyfenoler inklusive antrakinoner, fenolsyror och flavonoider, vars mekanismer tillskrivs vätebindningsbildning mellan polyamidabsorbenter, mobilfas och målföreningar. Gao et al. studerade kromatografi beteende polyfenoler inklusive fenolsyror och flavonoider på polyamid kolonn. Det visade sig att polyamiden fungerade som en vätebindande acceptor, och antalet fenolhydroxyler och deras positioner i molekylen påverkade adsorptionsstyrkan ., Förutom polyfenoler rapporterades också separation av andra typer av naturliga produkter med polyamidkolonnkromatografi. De totala saponinerna av Kuqingcha kan berikas av polyamidkolonnkromatografi, vilket signifikant minskade det systoliska trycket hos SHR-råtta . Med användning av en blandning av diklormetan och metanol i en gradient som eluent, de sju stora isokinolinalkaloider i Coptidis rhizom inklusive berberin (39), coptisin (40), palmatin (41), jatrorrhizin (42), columbamine (78), groenlandicin (79) (Fig. 4) och magnoflorin (80, Fig., 11) separerades i ett steg polyamid kolonn kromatografi .

adsorptiva makroporösa hartser är polymera adsorbenter med makroporösa strukturer men utan jonbytesgrupper som selektivt kan adsorbera nästan alla typer av naturliga produkter. De har använts i stor utsträckning antingen som ett fristående system eller som en del av en förbehandlingsprocess för att avlägsna föroreningar eller berika målföreningar på grund av deras fördelar, som inkluderar hög adsorptiv kapacitet, relativt låg kostnad, enkel regenerering och enkel skala upp., De adsorptiva mekanismerna för adsorptiva makroporösa hartser innefattar elektrostatiska krafter, vätebindning, komplex bildning och storlekssiktning mellan hartsarna och de naturliga produkterna i lösning. Yta, pordiameter och polaritet är de viktigaste faktorerna som påverkar hartsens kapacitet . 20(S)-protopanaxatriol saponiner (PTS) (81) och 20(S)-protopanaxadiol saponiner (PD) (82, Fig. 11) är kända som två stora bioaktiva komponenter i roten av Panax notoginseng., PTS och PDS separerades framgångsrikt med 30 och 80% (v/v) vattenhaltiga etanollösningar från D101-makroporös hartskolonnen. Kromatografibeteendena för PDS och PTS var nära omvänd faskromatografi när man jämför kromatografiska profiler av makroporös hartskolonnkromatografi med HPLC-kromatogrammet på en zorbax SB-C18-kolumn . Nyligen, Meng et al. erhållen de totala saponinerna av Panacis Japonici rhizom (PJRS) med användning av D101 makroporöst harts., Innehållet i de fyra stora saponinerna, chikusetsusaponiner V (55), IV (56) och IVa (57) och pseudoginsenosid RT1 (58) (Fig. 8), i de erhållna PJRS var mer än 73%. PJRS fungerade som standardreferens för kvalitetskontroll av Panacis Japonici rhizom . Vissa forskare antog att den huvudsakliga adsorptiva mekanismen mellan makroporösa hartser och polyfenoler var associerad med vätebindningsbildningen mellan syreatomen i hartsens eterbindning och väteatomen av fenolhydroxylgruppens fenolgrupp., Interaktionskraften för vätebindning påverkades signifikant av lösningens pH-värde .

silvernitrat är ett annat användbart fast stöd vid separation av naturliga produkter. De naturliga produkter som innehåller π-elektronerna interagerar reversibelt med silverjoner för att bilda polära komplex. Ju större antalet dubbelbindningar eller aromaticitet hos den naturliga produkten desto starkare komplexbilderna. Silvernitrat är typiskt impregnerat på kiselgel (SNIS) eller aluminiumoxid för separation. Flera forskargrupper rapporterade separationen av fettsyror på SNIS . Wang et al., rapporterade isoleringen av zingiberen från ingefära oleoresin genom SNIS kolonn kromatografi . Ett par isomerer, brasiliensyra (83, Fig. 11) och isobrasiliensic syra (84), var separerade från Calophyllum brasiliense av Lemos et al. på en SNISKOLONN . Vissa forskargrupper tillämpade också silvernitrat i tvåfassystemet i höghastighetsmotorströmskromatografi (HSCCC) för att förbättra separationen. Xanthochymol (85) och guttiferone E (86) är ett par av π bond benzophenone isomerer från Garcinia xanthochymus av AgNO3-HSCCC., Elueringsordningen för π-obligationsisomererna i denna AgNO3-HSCCC-separation är intern π-bindning (tidigare)< – terminalen, som är identisk med den som observerats från SNIS-kolumnkromatografi .

Separation baserad på Fördelningskoefficient

Partitionskromatografi (PC) följer principen för vätskeutvinning baserad på relativ löslighet i två olika icke urtagbara vätskor. I det tidiga skedet var en flytande fas belagd till en fast matris (kiselgel, kol, cellulosa etc.) som den stationära fasen och en annan flytande fas användes som den mobila fasen., Nackdelen med en lätt avlägsnad stationär fas och orepeatable resultat har lett till att denna typ av dator sällan används idag. Den bundna fasen, i vilken den flytande stationära fasen är kemiskt bunden till det inerta stödet, som används som den stationära fasen övervinner dessa nackdelar. Kommersiellt tillgängliga alkyl som C8 och C18, aryl, cyano och amino substituerade silaner används ofta som bundna faser, som ofta används för att separera en mängd olika naturliga produkter, särskilt i det slutliga reningssteget.

tre PTS (notoginsenosid R1 (87) (Fig., 11), ginsenosider Rg1 (55) (Fig. 8) och Re (88) (Fig. 11)) och två PDS (Fig. 3) var väl separerade i en C18–kolumn med EtOH-H2O-systemet som mobilfasen . En ny polyakrylamidbaserad kiseldioxid stationär fas syntetiserades av Cai et al. och framgångsrikt tillämpas i separationen av galaktooligosackarider och saponiner i Paris polyphylla med EtOH–H2O som den mobila fasen .

Counter-current chromatography (CCC) är typ av dator som håller den flytande stationära fasen genom gravitation eller centrifugalkraft., CCC har sällan använts i tidiga skeden på grund av dess dåliga stationära retention, lång separationstid och arbetsintensiv process. CCC förbättrades signifikant på 1980-talet, men när modern CCC, inklusive HSCCC och centrifugalpartitionskromatografi (CPC), utvecklades. De hydrodynamiska CCC-systemen som hsccc har en planetrotationsrörelse runt två roterande axlar utan roterande tätningar, vilket ger en lågtrycksfallsprocess. Hydrostatisk CCC, t ex,, centrifugalpartitionskromatografi, använder endast en roterande axel och har en serie sammankopplande kamrar för att fånga den stationära fasen som erbjuder en högre retention av den stationära fasen och ett högre systemtryck än för HSCCC. Det höga systemtrycket i CPC förhindrar förbättring av upplösningen genom att öka kolumnens längd. Hög prestanda CCC (HPCCC) representerar en ny generation av hydrodynamiska CCC och fungerar på samma sätt som HSCCC, men med en mycket högre g-nivå., Den HPCCC instrument genererar mer än 240 g, medan tidiga HSCCC utrustning som gav g-nivåer av mindre än 80 g. HPCCC förkortar separation tid till mindre än en timme jämfört med flera timmar i tidigare HSCCC och kan uppnå minst tio gånger genomströmningen av en HSCCC instrument ., Jämfört med den konventionella kolonn separationsmetoden med användning av en fast stationär fas, erbjuder både hydrostatiska och hydrodynamiska CCC-system vissa fördelar, inklusive eliminering av irreversibel adsorption och topp tailing, hög lastkapacitet, hög provåtervinning, minimal risk för prov denaturering och låg lösningsmedelsförbrukning. Begränsningen av CCC är att den endast separerar föreningarna i ett relativt smalt polaritetsfönster. Under de senaste 20 åren lockade HSCCC, HPCCC och CPC stor uppmärksamhet i separationsvetenskap och har använts i stor utsträckning vid separation av naturliga produkter., Tang et al. utvecklat en hsccc-metod med användning av ett tvåfaslösningssystem bestående av etylacetat-n-butanol-etanol-vatten (4: 2: 1.5: 8.5, v / v / v / v) För att separera sex flavon C-glykosider (89-94, Fig. 12), inklusive två nya föreningar från Lophatherum gracile . HSCCC, HPCCC och CPC har också framgångsrikt tillämpats vid separation av flyktig olja, vilket är svårt att separera via konventionell kolonn kromatografi., Sex flyktiga föreningar (curdion (95), curcumol (96), germakrone (97), curzeren (98), 1,8-cineol (99) och β-elemen (100)) isolerades av CPC från Curcuma wenyujins eteriska olja med hjälp av ett icke-akveöst tvåfaslösningssystem bestående av petroleumeter–acetonitril–aceton (4:3:1 v/v/v) ., Fyra stora seskviterpenoider (ar-turmeron (101), α-turmeron (102), β-turmeron (103) och e-atlanton (104)) med liknande strukturer separerades från Curcuma longas essentiella olja i en enda HSCCC-körning med ett tvåfaslösningssystem bestående av n-heptanetylacetat–acetonitril–vatten (9.5/0.5/9/1, v/v) och varje förening uppnådde över 98% renhet . Linalool (105), terpinen-4-ol (106), α-terpineol (107), p-anisaldehyd (108), anetol (109) och foeniculin (110) isolerades framgångsrikt från den essentiella oljan av Pimpinella anisum av HPCCC med hjälp av en stegvis gradienteluering ., Li et al. utvecklat en CPC-metod för separation av patchoulialkohol (111) med ett icke–vattenhaltigt eteracetonitril (1:1, v/v) lösningsmedelssystem. Mer än 2 g patchouli alkohol med över 98% renhet isolerades från 12,5 g eterisk olja över en 240 ml kolonn . Den stora volymen (flera liter) kolumnen har antagits i kommersiell hydrostatisk CCC och hydrodynamisk CCC-utrustning för pilot/industriell skala separation. Få rapporter kunde erhållas på grund av kommersiell sekretess. Det är svårt att bedöma om hydrostatisk eller hydrodynamisk CCC är bättre för industriella applikationer., Användare kan välja olika typer av CCC instrument för olika ändamål. När den stationära fasen är dåligt kvarhållen i hydrodynamisk CCC på grund av hög viskositet och små densitetsskillnader mellan de mobila och stationära faserna är den hydrostatiska CCC mer praktisk än hydrodynamisk CCC eftersom retentionen av den stationära fasen av hydrostatisk CCC är mindre känslig för de fysikaliska egenskaperna hos flytande system och kommer att ha en högre retention av den stationära fasen., När den stationära fasen är väl kvarhållen i hydrodynamisk CCC, kommer högre separationseffektivitet att erhållas från hydrodynamisk CCC än från hydrostatisk CCC med samma flytande system och liknande kolumnvolymer eftersom hydrostatisk CCC har relativt låg partitionseffektivitet på grund av en begränsad grad av blandning, och det hydrodynamiska systemet ger effektiv blandning för att ge en hög partitionseffektivitet.

Separation baserad på molekylstorleken

separationen av naturliga produkter genom membranfiltrering (MF) eller gelfiltreringskromatografi (GFC) baseras på deras molekylstorlekar. – herr talman!

membranfiltrering (MF)

I MF tillåter det semipermeabla membranet att mindre molekyler passerar genom och behåller de större molekylerna., MF av naturliga produkter kan karakteriseras som mikrofiltrering, ultrafiltrering och nanofiltrering baserat på porstorleken hos det applicerade membranet.

membranfiltrering har varit ett kraftfullt verktyg för koncentration, förtydligande och avlägsnande av föroreningar i labbet, liksom inom livsmedels-och läkemedelsindustrin. Innehållet i totala fenoler( 338%), klorogensyra (66) (Fig. 10) (483%), teobromin (112, Fig., 13) (323%), koffein (113) (251%), kondenserade tanniner (278%) och saponiner (211%) i det vattenhaltiga extraktet av Ilex paraguariensis ökade signifikant genom nanofiltrering . Kopplingsmembranfiltrering appliceras när ett enda membranfiltreringssteg inte är tillfredsställande. En sekvens av mikrofiltrering, ultrafiltrering och nanofiltrering applicerades vid isolering av bioaktiva komponenter från olivbladextrakt. Mikrofiltrering följt av ultrafiltrering avlägsnade föroreningarna större än 5 kDa., Nanofiltrering återhämtade antioxidativa och antibakteriella polyfenoler och flavonoider, och innehållet i huvudkomponenten, oleuropein (114), i nanofiltreringsretentatet koncentrerades ungefär tio gånger .

Gelfiltreringskromatografi (GFC)

Gelfiltreringskromatografi är också känd som gelpermeationskromatografi eller storlekskromatografi., De små molekylerna har en längre retentionstid i GFC än stora molekyler.

Sephadex bildas genom tvärbindande dextran , och G-typerna av Sephadex användes för separation av hydrofila föreningar såsom peptider, oligosackarider och polysackarider .

Sephadex LH20, ett hydroxipropylerat derivat av Sephadex G25, har både hydrofoba och hydrofila naturer. En adsorptionsmekanism var också involverad i separation med Sephadex LH-20. Sephadex LH-20 kan användas för separation av en mängd olika naturliga produkter i antingen ett vattenhaltigt eller icke-vattenhaltigt lösningsmedelssystem., De feruloylerade arabinoxylan-oligosackariderna av fleråriga spannmålsprodukter mellanvete separerades väl av Sephadex LH-20 med 100% vatten som mobilfas . Tre nya pyrimidinditerpener, axistatiner 1-3 (115-117, Fig. 14) tillsammans med tre kända formamides (118-120) var isolerad från anti-cancer aktiv CH2Cl2 bråkdel av Agelas axifera över Sephadex LH-20 kolumner med en serie av lösningsmedel system , följt av rening med hjälp av Prep-HPLC .

polyakrylamid (bio-gel P) och tvärbunden agaros användes också vid separation av naturliga produkter.

Separation baserad på jonstyrka

jonbyteskromatografi (IEC) separerar molekyler baserat på skillnaderna i deras Net surface charge. Vissa naturliga produkter, såsom alkaloider och organiska syror som har en funktionell grupp som kan jonisera, kan separeras av IEC., De laddade molekylerna kan fångas och frigöras av jonbytarharts genom att ändra den joniska styrkan i den mobila fasen (t.ex. ändra pH eller saltkoncentration). Katjonbytarhartser användes för separation av alkaloider, medan anjonjonjonbytarhartser användes för separation av naturliga organiska syror och fenoler.

de positivt laddade antocyaninerna separerades från de neutrala polyfenoliska föreningarna i det xad-7-behandlade Actinidia melanandra-extraktet (kiwifrukt) med användning av Dowex 50WX8 katjonbytarharts ., Feng och Zhao använde halvberedande kromatografi för att separera (-) epigallocatechin −gallat och (-) epicatechin-gallat (122) i te rå extrakt med polysackaridbaserad svagt sur gel CM-Sephadex C-25 . En ny alkaloid, fumonisin B6 (123), tillsammans med en känd alkaloid, fumonisin B2 (124), isolerades av IEC över Strata X-C mixed-mode RP-katjonbytarharts följt av omvänd fas kromatografi från svampen Aspergillus niger NRRL 326 kulturer extrakt .

andra moderna separationstekniker

molekylär destillation (MD)

molekylär destillation separerar molekylär genom destillation under vakuum vid en temperatur långt under dess kokpunkt. Det är en lämplig destillationsmetod för att separera termosensitiva och högmolekylära föreningar. Borgarello et al. erhållen en tymol (125, Fig., 16) anrikning fraktion från oregano eterisk olja genom molekylär destillation modelleras av artificiella neurala nätverk. Den erhållna fraktionen hade antioxidantegenskaper och kunde stabilisera solrosoljan . Tre typer av ftalater avlägsnades effektivt från sötorangeolja genom molekylär destillation under optimala förhållanden (förångningstemperatur på 50 °C, förångningstryck på 5 kPa och en matningsflödeshastighet på 0,75 ml/min) .

preparativ gaskromatografi (Prep-GC)

gaskromatografi (GC) med hög separationseffektivitet och snabb separation och analys gör det potentiellt den ideala preparativa processen.metod för separation av flyktiga föreningar. Insprutningsporten, kolonnen, split-enheten och fällanordningen för GC-utrustning måste ändras för preparativ separation på grund av brist på kommersiell Prep-GC .

fem flyktiga föreningar, nämligen curzeren (98) (6.,6 mg), β-elemen (100, Fig. 12) (5, 1 mg), curzerenon (126) (41, 6 mg), curcumenol (127) (46, 2 mg) och curcumenon (128) (21, 2 mg) (Fig. 17), separerades från metanolextraktet av Curcuma rhizom genom Prep-GC över en kolonn av rostfritt stål packad med 10% OV-101 (3 m × 6 mm, d.) efter 83 enstaka injektioner (20 µl) . Prep-GC applicerades också för separation av naturliga isomerer. Totalt 178 mg cis-asarone (129) och 82 mg trans-asarone (130) erhölls från eterisk olja av Acorus tatarinowii efter 90 enda injektioner (5 µl) på samma kolumn som ovan ., Prep-GC har blivit en viktig separationsmetod för naturliga flyktiga föreningar; en tyngre provbelastning och den preparativa kolonnen med stor diameter minskade effektiviteten . Samtidigt nackdelarna med Prep-GC, inklusive bristen på kommersiell Prep-GC utrustning, konsumtion av en stor volym bärargas, sönderdelning av termolabila föreningar under hög Driftstemperatur, svårigheterna med fraktion samling, och låg produktion, fortfarande begränsa användningen av Prep-GC.

superkritisk vätskekromatografi (SFC)

SFC använder superkritisk vätska som mobilfas. SFC integrerar fördelarna med både GC och vätskekromatografi (LC) eftersom de superkritiska vätskorna har egenskaper med hög upplösning, hög diffusivitet och låg viskositet, vilket möjliggör snabb och effektiv separation., SFC kan således använda en längre kolumn och mindre partiklar i den stationära fasen än HPLC, vilket ger större antal teoretiska plattor och bättre separation. SFC kan användas för separation av icke-flyktiga eller termiskt labila föreningar för vilka GC inte är tillämpligt. SFC-system är kompatibla med ett brett spektrum av olika detektorer, inklusive de som används i LC och GC-system., Polariteten hos den allmänt använda mobila fasen, s-CO2, i SFC ligger nära polariteten hos hexan, vilket resulterade i att SFC användes för separation av icke-polära naturprodukter som fettsyror, terpener och eteriska oljor i många år. Eluent modifierare som metanol och acetonitril förbättrar elueringsstyrkan, vilket ökar intresset för att separera polära naturprodukter från SFC .

Zhao et al. framgångsrikt separerade tre par av 25 r / s diastereomer spirostanol saponiner (131-136, Fig., 18) från TCM Trigonellae Sperma (frö av Trigonella foenum-graecum) på två CHIRALPAK IC kolumner tillsammans i tandem . Yang et al. tillämpas SFC för förberedande separation av två par 7-epimeric spiro oxindole alkaloider (137-140) från stjälkar med krokar av Uncaria macrophylla (ett naturläkemedel källa för TCM Uncariae Ramulus Cum Uncis) på en Viridis Prep Silica 2-EP OBD-kolumn med acetonitril innehåller 0.2% DEA ändras S-CO2. Den icke-vattenhaltiga mobilfasen som användes i SFC förhindrade tautomeriseringen av de separerade spirooxindolalkaloiderna ., SFC tillämpas också vid separation av naturliga enantiomerer. (R,S)-goitrin (141-142) är den aktiva ingrediensen i TCM Isatidis Radix. Den kirala separationen av (R) och (S) goitriner uppnåddes framgångsrikt genom prep-SFC på en Chiralpak IC-kolonn med acetonitril som organisk modifierare .

Molekylär imprintad teknik

Molekylär imprintad teknik har varit en attraktiv separationsmetod under det senaste decenniet på grund av dess unika egenskaper, som inkluderar hög selektivitet, låg selektivitet och låg selektivitet.kostnad och enkel förberedelse. Många komplementära håligheter med minnet av storlek, form och funktionella grupper av mallmolekylerna genereras när mallmolekylerna avlägsnas från den molekylära imprintade polymeren (MIP)., Således kommer mallmolekylen och dess analoger att ha det specifika erkännandet och selektiv adsorption för MIP. MIPs har använts i stor utsträckning vid separation av naturliga produkter eller som fastfas extraktionssorbenter för provberedning av växtbaserade material för att berika de mindre föreningarna.

Ji et al. utvecklad Multi-Mall molekylärt präglade polymerer med DL-tyrosin och fenylpyruvinsyra som mallmolekyler för att separera dencichin (143, Fig. 19) Från vattenextraktet av Panax notoginseng., Både dencichine och mallen molekyl av DL-tyrosin (144) innehåller en aminogrupp (NH2) grupp och en karboxylsyra (COOH) grupp, och den andra mallen molekyl, phenylpyruvic syra (145), har en α-keto syra (COCOOH) grupp som också kan hittas i strukturen av dencichine . Ma et al. utvecklat en preparativ separationsmetod för att separera solanesol (146) från tobaksblad genom flash kromatografi baserad på MIP., MIP framställdes med metylmetakrylat som monomer, solansol som mallmolekylen och etylenglykoldimetakrylat som tvärbindaren genom en suspension polymerisationsmetod. Totalt 370,8 mg solanesol med 98,4% renhet separerades från extraktet av tobaksblad med ett utbyte av 2,5% av tobaksbladets torra vikt . Du et al. använde den termo-responsiva magnetiska MIP för att separera de tre stora curcuminoiderna, curcumin (147), demetoxicurcumin (148) och bisdemetoxicurcumin (149) från TCM Curcumae Longae rhizom (rhizomen av Curcuma longa)., Den konstruerade termo-responsiva magnetiska MIP visade god imprinting faktor för curcuminoids i ett intervall mellan 2.4 och 3.1, termo-responsivitet och snabb magnetisk separation (5 s) .

simulerad rörlig sängkromatografi

simulerad rörlig säng (SMB) kromatografi använder flera kolumner med stationära faser (säng)., Motströmsrörelsen av sängen simuleras genom roterande ventiler, som periodiskt byter inlopp (matning och eluent) och utlopp (extrakt och raffinat). SMB-processen är en kontinuerlig separationsmetod och ett kraftfullt verktyg för storskalig separation av naturliga produkter med fördelen av lägre lösningsmedelsförbrukning under en kortare tidsperiod.

två cyklopeptider, cyklolinopeptider C och E (150-151, Fig., 20) erhölls från linfröolja med användning av en tre zon SMBC med åtta preparativa HPLC normalfas sfäriska kiselgelkolumner och med användning av absolut etanol som desorbent . Kang et al. utvecklat en tandem SMB process bestående av två fyra-zon SMB enheter i en serie med samma adsorbent partikelstorlekar i Ring i och Ring II för att separera paklitaxel (taxol, 74) (Fig. 11), 13-dehydroxybaccatin III (152), och 10-deacetylpaclitaxel (153). Paklitaxel återfanns i den första SMB-enheten medan 13 – dehydroxybaccatin III och 10-deacetylpaclitaxel separerades i den andra SMB-enheten ., Mun förbättrade denna SMB-kromatografimetod genom att använda olika partikelstorlekar adsorbent i Ring i och Ring II . Superkritiska vätskor kan också användas som desorbent i SMB-kromatografi. Liang et al. framgångsrikt tillämpat superkritisk koldioxid med etanol som desorbent för en tre-zon SMB att separera resveratrol (60) (Fig. 9) och emodin (44) (Fig. 4) från en rå extrakt av TCM Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix .

flerdimensionell kromatografisk separation

komponenterna i extraktet som utsattes för separation var komplexa, och i allmänhet kommer ingen ren förening att separeras i en kolumnkromatografi.-herr talman! Flerdimensionell separation baserad på den fasta fasutvinning och koppling av flera kolumner med olika stationära faser förbättrar avsevärt separationseffektiviteten., Med mer kommersiell flerdimensionell separationsutrustning som kommer in på marknaden blir separationen av naturliga produkter snabbare, effektivare och automatiserad.