Das Antigen für den FTA-ABS-Test sind ganze Bakterien. Die Bakterien können nicht auf Labormedien kultiviert werden, daher handelt es sich bei den verwendeten Organismen um eine lyophilisierte Suspension von T. pallidum, die aus Kaninchenhodengewebe extrahiert wurde. Dies wird verteilt und an einer Folie befestigt. Das Patientenserum wird mit einem Absorptionsmittel (dem „ABS“-Teil des Tests) gemischt, das einen Extrakt eines nicht pathogenen Treponems, Treponema phagedenis Biotyp Rieter, enthält. Der Zweck des Absorptionsmittels besteht darin, Anti-Treponema-Antikörper zu entfernen, die nicht spezifisch für die Syphilisbakterien sind., Das voradsorbierte Patientenserum wird dann dem Objektträger zugesetzt; Wenn der Patient mit Syphilis infiziert wurde, binden seine Antikörper an die Bakterien. FITC (ein Fluorophor)-markierter Anti-Treponeme-Antikörper und TRITC (ein anderer Fluorophor)-markierte Anti-Human-Antikörper werden als sekundäre Antikörper hinzugefügt. Die Spirochätenposition wird mithilfe der FITC-Färbung identifiziert, und die FITC-Färbung identifiziert, ob der Patient Anti-T. pallidum-Antikörper hat (Bindung an denselben Spirochäten).